一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法

摘要

一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法。包括以下步骤：第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟牛粪农家肥3000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米，浇透防冻水，利于早春顶凌播种，将种蒜贮藏于4℃冷库6‑8个月；第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面，同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和重量比例如下：酵素菌生物有机复合肥25公斤：硫酸钾复合肥10公斤：磷酸二铵10公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用。

说明书

技术领域：

本发明涉及一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法。

背景技术：

大蒜(Allium sativum)是重要的功能性食疗蔬菜，在世界范围内广泛栽培，目前，生产上栽培的大蒜品种只能通过蒜瓣或气生鳞茎进行无性繁殖，导致大蒜不育的因素很多，其中原因之一在于，在大蒜花芽起始发育后，鳞茎及气生鳞茎开始分化、膨大，导致幼小花蕾因营养不足而退化，因此，无法利用不同的大蒜种质资源开展常规杂交育种以及遗传学方面的研究，选育新品系只能通过随机或诱导突变、体细胞克隆变异、遗传转化等途径实现。因此，获得大量的功能性花、实现育性恢复是开展大蒜有性杂交、培育新品种的基础。

发明内容：

本发明的目的是提供一种大蒜小花数目增多，促进大蒜功能花发育的促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法。

上述的目的通过以下的技术方案实现：

1、一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法，包括以下步骤：

第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟农家肥2000-4000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米，浇透防冻水，利于早春顶凌播种，将种蒜贮藏于4℃冷库6-8个月；

第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面，同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和重量比例如下：酵素菌生物有机复合肥20-30公斤：硫酸钾复合肥5-15公斤：磷酸二铵5-15公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用；

第3步：4月8日前种植，种植期要对分蘖洋葱和大蒜进行选种，分蘖洋葱为抽薹开花型，分蘖洋葱种球要求外皮深紫、紧实度好、无病虫害和机械损伤、横径3-4厘米；大蒜种蒜选在6瓣蒜头，要求无病虫害和机械损伤、种瓣弓部饱满、顶芽肥大，播种前，用50％多菌灵500倍液分别浸泡分蘖洋葱种球和大蒜种瓣7个小时，捞出后，混入用水稻秸秆草木灰，充分混拌，使分蘖洋葱种球和大蒜种瓣表面沾满草木灰，分蘖洋葱和大蒜在土壤化冻5厘米、5厘米土壤温度达到3-5度时即可顶凌播种；

第4步：大蒜与分蘖洋葱相间种植模式：在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土，在其中一条种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南，分蘖洋葱则播种在另一条种植沟内，同样按株距10厘米标准播种，要求播种穴位位于2个种蒜穴位的中间，大蒜和分蘖洋葱相间种植，双行形成拐子苗，播种后覆盖细土4-5厘米，压实。

第5步：在分蘖洋葱抽出花薹、花苞膨大和大蒜花薹刚刚露出叶鞘时，搭建遮荫塑料大棚，为植株的后期生长发育提供最适宜环境条件，使植株完成后期生长发育。

一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法，包括以下步骤：

第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟牛粪农家肥3000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米，浇透防冻水，利于早春顶凌播种，将种蒜贮藏于4℃冷库6-8个月；

第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面，同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和重量比例如下：酵素菌生物有机复合肥25公斤：硫酸钾复合肥10公斤：磷酸二铵10公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用；

第3步：4月8日前种植，种植期要对分蘖洋葱和大蒜进行选种，分蘖洋葱种球要求外皮深紫、紧实度好、无病虫害和机械损伤、横径约3.5厘米；大蒜种蒜选在6瓣蒜头，要求无病虫害和机械损伤、种瓣弓部饱满、顶芽肥大，播种前，用50％多菌灵500倍液分别浸泡分蘖洋葱种球和大蒜种瓣7个小时，捞出后，混入用水稻秸秆草木灰，充分混拌，使分蘖洋葱种球和大蒜种瓣表面沾满草木灰，分蘖洋葱和大蒜在土壤化冻5厘米、5厘米土壤温度达到3-5度时即可顶凌播种；

第4步：大蒜与分蘖洋葱相间种植模式：在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土，在其中一条种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南，分蘖洋葱则播种在另一条种植沟内，同样按株距10厘米标准播种，要求播种穴位位于2个种蒜穴位的中间，大蒜和分蘖洋葱相间种植，双行形成拐子苗，播种后覆盖细土4-5厘米，压实。

第5步：在分蘖洋葱抽出花薹、花苞膨大和大蒜花薹刚刚露出叶鞘时，搭建遮荫塑料大棚，为植株的后期生长发育提供最适宜环境条件，使植株完成后期生长发育。

有益效果：

1、本发明本专利通过实施抽薹型分蘖洋葱与大蒜的间作方式，实现了大蒜功能性花的发育，同时促进花分生组织特征基因gaLFY与AsFUL的表达水平，为利用开花分蘖洋葱的化感效应促进大蒜花发育、开展大蒜生殖生物学研究提供了科学依据。

2、本发明专利以大蒜和分蘖洋葱为试验材料，通过实施大蒜与分蘖洋葱的间作、伴生，显著提高了大蒜植株生长势，平均株高和假茎粗分别为96.3cm和10.6mm，比对照组分别增高6.1cm、增粗2.4mm，显著高于未进行间作的大蒜植株。分蘖洋葱促进了大蒜的生殖发育，抽薹期比对照组(未进行间作的大蒜)提前4d，功能性大蒜小花数目增多，减少气生鳞茎的数目和大小；而且，上调花分生组织特征基因gaLFY和AsFUL的转录水平。抽薹型分蘖洋葱具有促进大蒜功能花发育的化感效应，利于实现大蒜育性恢复。

附图说明：

附图1是大蒜与分蘖洋葱相间种植模式(A)及大蒜单独种植模式(B)示意图。

附图2是分蘖洋葱与大蒜的花序图。

附图3是大蒜花分生组织特征基因gaLFY与AsFUL表达的半定量RT–PCR分析图。

附图4gaLFY与AsFUL在花芽中表达的定量qRT-PCR分析图。

具体实施方式：

实施例1：

1、一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法，其特征是:包括以下步骤：

第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟农家肥2000-4000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米，浇透防冻水，利于早春顶凌播种，将种蒜贮藏于4℃冷库6-8个月；

第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面，同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和重量比例如下：酵素菌生物有机复合肥20-30公斤：硫酸钾复合肥5-15公斤：磷酸二铵5-15公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用；

第3步：4月8日前种植，种植期要对分蘖洋葱和大蒜进行选种，分蘖洋葱为抽薹开花型，分蘖洋葱种球要求外皮深紫、紧实度好、无病虫害和机械损伤、横径3-4厘米；大蒜种蒜选在6瓣蒜头，要求无病虫害和机械损伤、种瓣弓部饱满、顶芽肥大，播种前，用50％多菌灵500倍液分别浸泡分蘖洋葱种球和大蒜种瓣7个小时，捞出后，混入用水稻秸秆草木灰，充分混拌，使分蘖洋葱种球和大蒜种瓣表面沾满草木灰，分蘖洋葱和大蒜在土壤化冻5厘米、5厘米土壤温度达到3-5度时即可顶凌播种；

第4步：大蒜与分蘖洋葱相间种植模式：在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土，在其中一条种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南，分蘖洋葱则播种在另一条种植沟内，同样按株距10厘米标准播种，要求播种穴位位于2个种蒜穴位的中间，大蒜和分蘖洋葱相间种植，双行形成拐子苗，播种后覆盖细土4-5厘米，压实。

第5步：在分蘖洋葱抽出花薹、花苞膨大和大蒜花薹刚刚露出叶鞘时，搭建遮荫塑料大棚，为植株的后期生长发育提供最适宜环境条件，使植株完成后期生长发育。

实施例2：

一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法，包括以下步骤：

第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟农家肥2000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米，浇透防冻水，利于早春顶凌播种，将种蒜贮藏于4℃冷库6个月；

第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面，同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和重量比例如下：酵素菌生物有机复合肥20公斤：硫酸钾复合肥5公斤：磷酸二铵5公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用；

第3步：4月8日前种植，种植期要对分蘖洋葱和大蒜进行选种，分蘖洋葱为抽薹开花型，分蘖洋葱种球要求外皮深紫、紧实度好、无病虫害和机械损伤、横径3厘米；大蒜种蒜选在6瓣蒜头，要求无病虫害和机械损伤、种瓣弓部饱满、顶芽肥大，播种前，用50％多菌灵500倍液分别浸泡分蘖洋葱种球和大蒜种瓣7个小时，捞出后，混入用水稻秸秆草木灰，充分混拌，使分蘖洋葱种球和大蒜种瓣表面沾满草木灰，分蘖洋葱和大蒜在土壤化冻5厘米、5厘米土壤温度达到3度时即可顶凌播种；

第4步：大蒜与分蘖洋葱相间种植模式：在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土，在其中一条种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南，分蘖洋葱则播种在另一条种植沟内，同样按株距10厘米标准播种，要求播种穴位位于2个种蒜穴位的中间，大蒜和分蘖洋葱相间种植，双行形成拐子苗，播种后覆盖细土4厘米，压实。

第5步：在分蘖洋葱抽出花薹、花苞膨大和大蒜花薹刚刚露出叶鞘时，搭建遮荫塑料大棚，为植株的后期生长发育提供最适宜环境条件，使植株完成后期生长发育。

实施例3：

一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法，其特征是:包括以下步骤：

第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟农家肥4000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米，浇透防冻水，利于早春顶凌播种，将种蒜贮藏于4℃冷库8个月；

第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面，同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和重量比例如下：酵素菌生物有机复合肥30公斤：硫酸钾复合肥15公斤：磷酸二铵15公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用；

第3步：4月8日前种植，种植期要对分蘖洋葱和大蒜进行选种，分蘖洋葱为抽薹开花型，分蘖洋葱种球要求外皮深紫、紧实度好、无病虫害和机械损伤、横径4厘米；大蒜种蒜选在6瓣蒜头，要求无病虫害和机械损伤、种瓣弓部饱满、顶芽肥大，播种前，用50％多菌灵500倍液分别浸泡分蘖洋葱种球和大蒜种瓣7个小时，捞出后，混入用水稻秸秆草木灰，充分混拌，使分蘖洋葱种球和大蒜种瓣表面沾满草木灰，分蘖洋葱和大蒜在土壤化冻5厘米、5厘米土壤温度达到5度时即可顶凌播种；

第4步：大蒜与分蘖洋葱相间种植模式：在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土，在其中一条种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南，分蘖洋葱则播种在另一条种植沟内，同样按株距10厘米标准播种，要求播种穴位位于2个种蒜穴位的中间，大蒜和分蘖洋葱相间种植，双行形成拐子苗，播种后覆盖细土5厘米，压实。

第5步：在分蘖洋葱抽出花薹、花苞膨大和大蒜花薹刚刚露出叶鞘时，搭建遮荫塑料大棚，为植株的后期生长发育提供最适宜环境条件，使植株完成后期生长发育。

实施例4：

一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法，包括以下步骤：

第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟农家肥3000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米，浇透防冻水，利于早春顶凌播种，将种蒜贮藏于4℃冷库7个月；

第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面，同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和重量比例如下：酵素菌生物有机复合肥10公斤：硫酸钾复合肥10公斤：磷酸二铵10公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用；

第3步：4月8日前种植，种植期要对分蘖洋葱和大蒜进行选种，分蘖洋葱为抽薹开花型，分蘖洋葱种球要求外皮深紫、紧实度好、无病虫害和机械损伤、横径3.5厘米；大蒜种蒜选在6瓣蒜头，要求无病虫害和机械损伤、种瓣弓部饱满、顶芽肥大，播种前，用50％多菌灵500倍液分别浸泡分蘖洋葱种球和大蒜种瓣7个小时，捞出后，混入用水稻秸秆草木灰，充分混拌，使分蘖洋葱种球和大蒜种瓣表面沾满草木灰，分蘖洋葱和大蒜在土壤化冻5厘米、5厘米土壤温度达到4度时即可顶凌播种；

第4步：大蒜与分蘖洋葱相间种植模式：在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土，在其中一条种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南，分蘖洋葱则播种在另一条种植沟内，同样按株距10厘米标准播种，要求播种穴位位于2个种蒜穴位的中间，大蒜和分蘖洋葱相间种植，双行形成拐子苗，播种后覆盖细土4.5厘米，压实。

第5步：在分蘖洋葱抽出花薹、花苞膨大和大蒜花薹刚刚露出叶鞘时，搭建遮荫塑料大棚，为植株的后期生长发育提供最适宜环境条件，使植株完成后期生长发育。

实施例5：

一种促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法，包括以下步骤：

第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟牛粪农家肥3000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米，浇透防冻水，利于早春顶凌播种，将种蒜贮藏于4℃冷库6-8个月；

第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面，同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和重量比例如下：酵素菌生物有机复合肥25公斤：硫酸钾复合肥10公斤：磷酸二铵10公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用；

第3步：4月8日前种植，种植期要对分蘖洋葱和大蒜进行选种，分蘖洋葱为抽薹开花型，分蘖洋葱种球要求外皮深紫、紧实度好、无病虫害和机械损伤、横径约3.5厘米；大蒜种蒜选在6瓣蒜头，要求无病虫害和机械损伤、种瓣弓部饱满、顶芽肥大，播种前，用50％多菌灵500倍液分别浸泡分蘖洋葱种球和大蒜种瓣7个小时，捞出后，混入用水稻秸秆草木灰，充分混拌，使分蘖洋葱种球和大蒜种瓣表面沾满草木灰，分蘖洋葱和大蒜在土壤化冻5厘米、5厘米土壤温度达到3-5度时即可顶凌播种；

第4步：大蒜与分蘖洋葱相间种植模式：在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土，在其中一条种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南，分蘖洋葱则播种在另一条种植沟内，同样按株距10厘米标准播种，要求播种穴位位于2个种蒜穴位的中间，大蒜和分蘖洋葱相间种植，双行形成拐子苗，播种后覆盖细土4-5厘米，压实。

第5步：在分蘖洋葱抽出花薹、花苞膨大和大蒜花薹刚刚露出叶鞘时，搭建遮荫塑料大棚，为植株的后期生长发育提供最适宜环境条件，使植株完成后期生长发育。

实施例6：

1材料与方法

1.1材料

试验材料‘伊宁红皮’大蒜和分蘖洋葱由哈尔滨艾利姆农业科技有限公司提供。试验在哈尔滨艾利姆农业科技有限公司位于哈尔滨市阿城区亚沟镇的试验基地进行。分蘖洋葱为抽薹开花型。

1.2田间种植

促进大蒜开花的分蘖洋葱与大蒜间作的种植方法：包括以下步骤：

第1步：秋季结合深翻整地，每亩施入充分腐熟农家肥主要(主要是牛粪)3000公斤，实行南北向宽垄作，垄宽80厘米、高15厘米、长10米。浇透防冻水，利于早春顶凌播种。将种蒜贮藏于4℃冷库6-8个月；

第2步：第二年春季4月5日前进行整地，耙碎土块，平整垄面。同时配制播种基肥，每亩施入的播种基肥种类和比例如下：酵素菌生物有机复合肥25公斤：硫酸钾复合肥10公斤：磷酸二铵10公斤，充分搅拌混匀，以备播种之用。

第3步：4月8日种植，种植期要对分蘖洋葱和大蒜进行选种。分蘖洋葱种球要求外皮深紫、紧实度好、无病虫害和机械损伤、横径约3.5厘米；‘伊宁红皮’大蒜种蒜选在6瓣蒜头，要求无病虫害和机械损伤、种瓣弓部饱满、顶芽肥大。播种前，用50％多菌灵500倍液分别浸泡分蘖洋葱种球和大蒜种瓣7个小时，捞出后，混入用水稻秸秆草木灰，充分混拌，使分蘖洋葱种球和大蒜种瓣表面沾满草木灰。分蘖洋葱和大蒜在在土壤化冻5厘米、5厘米土壤温度达到3～5度时即可顶凌播种。

第4步：大蒜与分蘖洋葱相间种植模式。在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土。在其中一条种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南。分蘖洋葱则播种在另一条种植沟内，同样按株距10厘米标准播种，要求播种穴位位于2个种蒜穴位的中间，形成拐子苗(图1，A)。播种后覆盖细土4-5厘米，压实。

图1大蒜与分蘖洋葱相间种植模式(A)及大蒜单独种植模式(B)

大蒜单独种植模式：在垄面上按行距30厘米标准开2条深6厘米的种植沟，然后浇水、撒播施入播种基肥，再覆盖1厘米厚的细土。在种植沟内按株距10厘米标准播种大蒜，要求种蒜弓部朝南。两条种植沟内种植的种蒜要间隔开来，形成拐子苗(图1，B)。播种后覆盖细土4-5厘米，压实。

第5步：在分蘖洋葱抽出花薹、花苞膨大和大蒜花薹刚刚露出叶鞘时，选取健壮抽薹大蒜植株移植到30cm×28cm的营养钵中，然后放置于遮荫塑料大棚中，提供最适宜环境条件，使植株完成后期生长发育阶段。

1.3花苞膨大后的气生鳞茎处理

移栽至营养钵并放置在遮荫塑料大棚成活后，在大蒜花序发育初期即花苞开始膨大时，用解剖刀去除佛焰苞片。在间作的大蒜群体和未间作的大蒜群体中，分别有15株大蒜做剥除和保留气生鳞茎处理，统计每株花序的小花数。

1.4花分生组织特征基因gaLFY与AsFUL的表达分析

利用TransZol Plant RNA试剂盒(TransGen公司)提取大蒜花芽总RNA。以5μg总RNA为模板，利用接头引物P19E(表1)、反转录试剂盒(TransGen公司)合成第一链cDNA。

设计基因特异性引物(表1)，以18S rRNA基因为内参，分析大蒜花分生组织特征基因gaLFY与AsFUL在花芽中的表达情况。

半定量RT-PCR在PE-9700型PCR仪上进行，PCR程序：94℃预变性5min；随后30个循环，每循环94℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸30s。最后一个循环后，72℃延伸7min。1％琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增结果。

在7500fast型PCR仪上进行实时荧光定量PCR。依据Power Green PCRMaster Mix试剂盒(Applied Biosystems)操作手册配制反应体系。反应程序：95℃预变性2min；随后40个扩增循环(95℃10s，60℃45s)。以18S rRNA基因的转录表达水平为内参，采用2^-ΔΔCT法分析gaLFY、AsFUL基因的相对表达水平。设置3个生物学重复。

表1大蒜gaLFY与AsFUL基因表达分析所用引物

注：F表示正向引物；R表示反向引物。

2结果

2.1分蘖洋葱与大蒜间作促进大蒜的生长发育

抽薹、叶片数、假茎粗、株高等生物学性状调查结果表明(表2)，与抽薹型分蘖洋葱间作可以促进大蒜提早抽薹，初抽薹期为6月8日，相对于对照组的初抽薹期提前了4d。抽薹率为98.6％，显著高于对照组82.4％的抽薹率。试验组和对照组的叶片数没有显著差异，平均叶数8片。分蘖洋葱伴生的大蒜植株生长势较强，叶色浓绿，平均株高和平均假茎粗分别为96.3cm和10.6mm，显著高于对照组的90.2cm和8.2mm。

表2分蘖洋葱对大蒜生长发育的影响

注：同列数据后的相同小写字母表示差异不显著，不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。

2.2分蘖洋葱与大蒜间作促进大蒜开花

移栽至营养钵并放置在遮荫塑料大棚后，分蘖洋葱和大蒜植株均能正常完成开花过程。分蘖洋葱聚伞形花序发育正常，平均小花数约180朵(图2，A)。大蒜花序发育的后期即花苞完全膨大、小花发育完成后，统计气生鳞茎数、大小和功能性小花数(表3)。结果表明，分蘖洋葱具有促进大蒜花发育的化感效应，有助于功能花的发育(图2，D、E)，每朵小花有6枚花瓣、6枚雄蕊、1枚三心皮雌蕊(图2，F)。试验组中，剥除气生鳞茎的花序其小花数最多达到105朵，平均为55.6朵(图2，E)，而保留气生鳞茎的花序中小花数平均为26.8朵(图2，D)；对照组中，保留气生鳞茎的花苞中小花数最多达到23朵，平均仅为8.1朵(图2，B)，剥除气生鳞茎的花序其小花数最多达到31朵，平均为14.9朵(图2，C)。由此可知，不论是否剥除气生鳞茎，试验组植株花序中的平均小花数均显著多于对照组。同时，试验组保留的气生鳞茎(图2，D)平均横径为0.42cm，比对照组(图2，B)小0.19cm，说明分蘖洋葱通过化感作用抑制气生鳞茎的发育膨大。无论是试验组还是对照组，与剥除气生鳞茎的花序相比，保留气生鳞茎的花序其小花数目显著减少，说明气生鳞茎不利于小花发育。

表3分蘖洋葱对大蒜花序发育的影响

注：同列数据后的相同小写字母表示差异不显著，不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。

图2分蘖洋葱与大蒜的花序

A：分蘖洋葱花序；B：对照组大蒜花序，保留气生鳞茎；C：对照组大蒜花序，剥除气生鳞茎；D：试验组大蒜花序，保留气生鳞茎；E：试验组大蒜花序，剥除气生鳞茎；F：功能性小花

2.3与分蘖洋葱间作可以上调大蒜花分生组织特征基因gaLFY与AsFUL的表达

半定量RT-PCR和qRT-PCR检测大蒜gaLFY、AsFUL在花芽中的表达情况。结果表明(图3、4)，在分蘖洋葱的化感作用下，剥除气生鳞茎的大蒜花芽其gaLFY、AsFUL表达丰度最高，而对照组未剥除气生鳞茎的花芽其gaLFY、AsFUL表达最弱。说明分蘖洋葱通过上调gaLFY、AsFUL基因表达而促进大蒜小花发育。同时，气生鳞茎的存在影响花芽的发育，因为，无论是试验组还是对照组，剥除气生鳞茎花序中花芽的gaLFY、AsFUL转录水平显著高于未剥除气生鳞茎花序中花芽的表达水平(图4)。

图3大蒜花分生组织特征基因gaLFY与AsFUL表达的半定量RT–PCR分析

1.试验组大蒜花芽，剥除气生鳞茎(EBR)；2.试验组大蒜花芽，保留气生鳞茎(EBK)；3.对照组大蒜花序，剥除气生鳞茎(CBR)；4.对照组大蒜花序，保留气生鳞茎(CBK)。

图4 gaLFY与AsFUL在花芽中表达的定量qRT-PCR分析

3主要结论

3.1抽薹型分蘖洋葱促进大蒜开花及功能性小花发育

从大蒜开花生物特性方面可知，分蘖洋葱与大蒜间作，表现出促进大蒜开花和功能小花发育的化感作用。分蘖洋葱的化感作用可以阻断气生鳞茎发育膨大致使发育中断而干枯，从而为大蒜小花发育创造了营养条件。化感处理后，大蒜花苞中膨大的气生鳞茎平均为8.5粒，横径为0.42cm，未经化感处理的植株其气生鳞茎平均为15.6粒，横径为0.61cm(表3，图2，B、D)，证实了气生鳞茎的存在是大蒜小花发育的屏障。

3.2抽薹型分蘖洋葱上调大蒜花分生组织特征基因gaLFY与AsFUL的表达

定量RT-PCR检测结果表明，通过与分蘖洋葱的间作伴生，大蒜花分生组织特征基因gaLFY和AsFUL转录水平发生上调，促使功能性小花数量增多。