Einfluss der Zentrifugationsmethode auf die Qualitat und Kryokonservierung von Hengstsamen

摘要

Das Ziel der vorliegenden Studie war es, den Einfluss von verschiedenen Zentrifugationsmethoden auf Spermienverlust und Gefriersamenqualitat abzuklaren. Dazu wurden je drei Ejakulate von 8 gekorten Warmbluthengsten des Nationalgestüts Avenches gewonnen, und zur Entfernung des Seminalplasmas nach drei verschiedenen Methoden zentrifugiert. Bei Methode I (Referenzmethode) erfolgte die Zentrifugation bei einer relativen Zentrifugalbeschleunigung von 600 X g wahrend 10 Minuten. Bei Methode II wurde bei 1000 X g wahrend 2 Minuten und bei Methode III bei 2000 x g wahrend 2 Minuten zentrifugiert. Nach der Zentrifugation wurden jeweils 90% des Uberstandes abpipettiert und darin die Anzahl Samenzellen (Spermienverlust) bestimmt. Nach Resuspension mit Gefrierverdünner erfolgte die Bestimmung der funktioneilen Membranintegritat mittels HOS-Test sowie die Beurteilung der Motilitat. Im aufgetauten Samen prüften wir die Motilitat, die Vitalitat (SYBR-14/PI), die funk-tionelle Membranintegritat (HOS-Test) und den Akrosomstatus mit dem Chlortetracyclinassay (CTA). Unsere Ergebnisse zeigen, dass der durchschnittliche Spermienverlust (1,1,9%; II, 8.7%; III, 3.7%) bei allen drei Zentrifugationsmethoden signifikant (P < 0.05) verschieden war. Bei den Samenqualitatsparametern im aufgetauten Samen konnten wir nur im HOS-Test bei Methode III (52.1%) signifikant schlechtere Werte als bei den Methoden I (55.5%) und II (55.3%) feststellen. Der zur Bestimmung des Akrosomstatus durchgeführte CTA zeigte, dass bei allen drei Methoden im aufgetauten Samen mehr als 70% der Spermien kapa-zitiert und rund 25% kapazitiert und akrosom-reagiert waren. Aufgrund unserer Ergebnisse kann gefolgert werden, dass sowohl der Spermienverlust wie auch die funktionelle Membranintegritat (HOS-Test) im aufgetauten Samen von der Zentrifugationsmethode signifikant beeinflusst wird. Deshalb soll der Hengstsamen vor der Kryokonservierung bei 600 X g -wahrend 10 Minuten zentri-fugiert werden, da mit dieser Methode der Sper-mienverlust am geringsten und die Samenqualitat nach dem Auftauen am besten waren.