ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ РНК-ПОЛИМЕР АЗЫ Escherichia coli С TATA-СВЯЗЫВАЮЩИМ БЕЛКОМ ЭУКАРИОТ

摘要

Изучали взаимодействие РНК-полимеразы Е, coli, ее рекомбинантных полного и минимального ферментов и σ-субъединицы, по отдельности, с ТАТА-связывающим белком (ТВР) эукариот. Показано, что в случае предынкубации полной РНК-полимеразы с ТВР в возрастающей концентрации и последующей инкубации с одинаковыми количествами фосфамидного производного ТАТА-со-держащего олигодезоксирибонуклеотида, меченного ~(32)Р, по мереувеличения концентрации ТВР уменьшается количество ковалентных комплексов полного фермента с фосфамидным производным меченого олигодезоксирибонуклеотида. Эти данные косвенно свидетельствуют об образовании комплексов РНК-полимеразы с ТВР. С помощью метода задержки в гелепоказано, что, в отличие от полного фермента, ни минимальный фермент, ни σ-субъединица РНК-полимеразы Е. coli не взаимодействуют с ТВР: при одновременной инкубации в реакционной смеси образуются как комплексы минимального фермента или σ-субъединицы, так и комплексы ТВР с меченымолиго-дезоксирибонуклеотидом. Эти результаты свидетельствуют о функциональном сходстве РНК-полимеразы Е. coli с РНК-полимеразой II эукариот, а также о том, что для выполнения специфических функций субъединицы РНК-полимеразы Е. coli должны находиться в ансамбле субъединиц полногофермента.