Из горячих источников района озера Байкал (Баргузинский Национальный Заповедник) и кальдеры Узон (Камчатка) выделено три штамма анаэробных термофильных бактерий, способных расти на ага-розе как источнике энергии и углерода. Клетки всех трех штаммов представляли собой споровые палочки с перитрихальным жгутикованием. Новые изоляты росли при температуре 55-60°С и рН 6.5-7.0, сбраживая широкий спектр органических субстратов. Анализ последовательностей 16S рРНК позволил отнести штаммы В5 и К14 к представителям рода Thermoanaerobacter, а штамм К67 - к Caldoanaero-bacter. По результатам ДНК-ДНК гибридизации штамм В5 определен как Thermoanaerobacter wiegelii. Из культуральной жидкости штамма В5, выращенного на среде с 0.3% агарозыи 0.3% галактозы, была выделена агараза с помощью препаративного электрофореза в ПААГ и последующей гель-хроматографии. Фермент имел молекулярную массу 67 кДа и рI 4.2. Агараза Tethrmoanaerobacter wiegelii B5 проявляла активность в диапазоне рН от 3.5 до 7.0 с оптимумом при 5.2 и в температурном интервале от 50 до 80°С с оптимумом при 70°С. При этом преинкубация фермента при 90°С в течение 60 минут не приводила к уменьшение агаразной активности. Активность агаразы возрастала в присутствии ионов металлов; максимальный эффект наблюдался при добавлении 5 мМ Mg~(2+) и 25 мМ Co~(2+).
展开▼
