Исследование структурно-функциональных взаимодействий полиэдрина вируса ядерного полиэдроза тутового шелкопряда (ВогпЬух топ) с прот

摘要

Известно, что полиэдры ВЯП В. топ содержат щелочную протеазу, расщепляющую в условиях растворения полиэдров 1п Шго (рН 10,5) полипептидную цепь полиэдрина (молекулярная масса (м. м.) 28500) до перекрывающихся фрагментов с м. м. 25000, 22000, 19000, 10000 и 8000, При этом полиэдрин в растворе с рН 10,5 существует в виде высокомолекулярных 133- (70 %) и > 138- (30 %) ассоциатов. Показано, что в процессе гель-фильтрации при рН 10,5 через сефарозу 6В раствора полиэдрина с рН 10,5 происходит частичная диссоциация высокомолекулярных ассоциатов до ранее неизвестного 8,58-ассоциата, полипептида с м. м. 25000 и его димера с коэффициентом седиментации 3,45. Причем недиссоциированные высокомолекулярные ассоциаты и 8,58-ассоциат содержат только целую полипептидную цепь (м. м. 28500). В процессе гель-фильтрации при рН 11,0 растворов полиэдрина с тем же значением рН происходит полная диссоциация высокомолекулярных ассоциатов до 8,58-ассоциата, полипептида с м. м. 22000 и его димера с коэффициентом седиментации 3,28. 8,58-ассоциат также содержит только целую полипептидную цепь. РНК в процессе гель-фильтрации в обоих случаях обнаруживается в высокомолекулярной (138 и более) и низкомолекулярной (м. м, < 25000) зонах. 8,58-ассоциат не содержит РНК. После предварительного подогрева полиэдров при температуре 80-90 °С протеаза не расщепляет полиэдрина в растворе с рН 10,5. В процессе гель-фильтрации при рН 10,5 таких растворов диссоциация высокомолекулярных ассоциатов до 8,58-ассоциата с целой полипептидной цепью происходит в значительно меньшей степени, но при этом отделяется малый РНП-комп-лекс с м. м. 20000-25000 и коэффициентом седиментации 2,98, включающий полипептид с м. м. 10000-12000. Обсуждается влияние протеазы и РНК на диссоциацию полиэдрина и высвобождение вирионов из полиэдров при растворении их 1п ШУО.