Спектрофотометрически изучена кинетика отщепления О_2 от МbО_2 кашалота в присутствии дышащих митохондрий из печени крысы в условиях, когда митохондрии отделены от раствора белка полупроницаемой пленкой, способной пропускать низкомолекулярные вещества, и непосредственно врастворе МЬО_2 с митохондриями (среда инкубации: 15-35 мМ сукцината, 150 мМ сахарозы, 100 мМ КС1, 0,5 мМ ЭГТА, 5 мМ КН_2РО_4, 10 мМ MOPS, pH 7,4). Показано, что отщепление О_2 от МЬО_2 при физиологических рO_2 возможно лишь при непосредственном контакте его с митохондриями. Скорость дезоксигенации МЬО_2 не зависит от концентрации белка (нулевой порядок по [MbO_2] в отличие от первого порядка реакции в отсутствие митохондрий) и полностью совпадает со скоростью потребления О_2 митохондриями в тех же условиях по данным полярографии. Изучена зависимость скорости отщепления О_2 от концентрации МbО_2 и митохондрий, а также влияние на скорость реакции общего заряда молекулы миоглобина, для чего изучены МbО_2 лошади (рI 7,1), МbО_2 кашалота (рI 8,3), его цинковый комплекс, Zn-MbO_2 (pI > 8,3), а также карбоксиметилированное по остаткам гистидина производное, СМ-МbO_2 кашалота (рI5,2). Из полученных данных следует, что механизм дезоксигенации МЬО_2 в клетке включает его взаимодействие с митохондриальной мембраной, вследствие чего сродство Mb к О_2 уменьшается в несколько раз, что соответствует сдвигу кривой диссоциации Mb к более высоким рО_2.
展开▼
机译：在有呼吸线粒体存在的条件下，通过能透过低分子量物质的半透膜将线粒体从蛋白溶液中分离出来，并直接在МbО_2的溶液中，用线粒体15孵育（35孵育），在存在来自大鼠肝脏的呼吸线粒体的条件下，用分光光度法研究了从大鼠肝脏呼吸的线粒体中分光光度法研究的从鲸鱼MbO_2裂解O_2的动力学。蔗糖，100 mM KCl，0.5 mM EGTA，5 mM KH_2PO_4、10 mM MOPS，pH 7.4）。已经表明，仅在与线粒体直接接触的情况下，才可能在生理性pO_2处从MLO_2裂解O_2。根据极谱数据，MbO_2的脱氧速率不取决于蛋白质浓度（与不存在线粒体时的一阶反应相比，[MbO_2]中的零级反应），并且与线粒体在相同条件下消耗O_2的速率完全一致。 O_2裂解速率对МbО_2和线粒体浓度的依赖性以及对肌红蛋白分子总电荷反应速率的影响，为此我们研究了马的МbО_2（рI7,1），抹香鲸的МbО_2（рI8.3），其锌络合物，Zn-M Zn-M （pI＞ 8.3），以及在组氨酸残基上羧甲基化的衍生物，即抹香鲸的CM-MbO_2（pI5.2）。从获得的数据可以看出，MbO_2在细胞中的脱氧机理包括其与线粒体膜的相互作用，其结果是Mb对O_2的亲和力下降了数倍，这对应于Mb解离曲线向较高pO_2的移动。
展开▼
