凍結技法における新展開　高圧凍結技法

摘要

生物試料を電子顕微鏡で観察するためには山一般にはグルタールアルデヒドや四酸化オスミウムによる化学固定を行い，エタノール上昇系列で脱水，エボンなどのプラスチック樹脂に包捜している。この過程において様々なアーチファクトが生じており，電子顕微鏡での観察像が果たして生体の其の姿をどの程度反映しているものか慎重に検討する必要がある。 生体に限なりく近い状態で，細胞や組織を観察することができれば，種々の生理的条件下での梢造的根拠をより正確にかつ的確に提示することが可能となるはずである。 このような目的に一歩でも近づける技法として凍結技法が開発されてきた。 瞬時に細胞?組織を凍結することにより，その超徴構造ならびに構成成分をあるがままに保存する魅力的な方法である。 凍結技法として金属庄着法，浸活法，スプレー法などが月］いられてきたが，生物試料を扱う限り，凍結の際の水晶形成という新たな問題を避けることが出来ない。 従来から汎用されている常圧下での凍結では水晶形成の乏しい硝子様凍結（Vitrification）の範囲は表面からおよそ10Flm程度が限界となっている。 本稿で紹介する高圧凍結技法は従来の凍結技法の限界を通かに凌ぐ深い硝子梯凍結が行える魅力的な方法である。