Биотинилированные олигосахариды — синтетические аналоги фрагментов капсульных полисахаридов Streptococcus pneumoniae серотипов 3 и 14 в оценке уровня поствакцинальных антител к неогликоконъюгатам

摘要

В работе представлены данные по использованию биотинилированных синтетических олигосахаридов, соответствующих различным фрагментам капсульных полисахаридов (КП) S. pneumoniae серотипов 3 и 14, для оценки уровня поствакцинальных антител в сыворотках мышей, иммунизированных конъюгатами олигосахаридных лигандов с бычьим сывороточным альбумином (БСА). Уровень специфических антител в одних и тех же сыворотках крови мышей, выявленный методом иммуноферментного анализа (ИФА) с помощью биотинилированных олигосахаридов, иммобилизованных на поверхности стрептавидиновых планшетов для ИФА, был существенно выше, чем при использовании бактериального КП в качестве покрывающего антигена со стандартными планшетами для ИФА. Соответственно, использованная в работе система с биотинилиро-ванными олигосахаридами является значительно более чувствительной относительно системы сравнения и может быть использована для выявления специфических антител в более разведенных сыворотках. Самый высокий титр антител к биотинилированным олигосахаридам был определен в сыворотках крови мышей, иммунизированных конъюгатами БСА с тетрасахаридными лигандами, отвечающими фрагментам КП двух исследуемых серотипов пневмококка. В реакции с биотинилированными олигосахаридами и в тесте агглютинации на стекле с живыми микробными клетками, но не в реакции ингибирования ИФА бактериальным КП, антигенсвязывающая способность антител к тетрасахаридам, отвечающим одному и двум повторяющимся звеньям КП S. pneumoniae серотипа 14 и 3 соответственно, превышала антигенсвязывающую способность антител к БСА-конъюгатам с олигосахаридами другой химической структуры. Проведенное исследование позволило обосновать выбор тетрасахаридных лигандов для использования при создании вакцин третьего поколения против S. pneumoniae серотипов 3 и 14, а использование биотинилированных олигосахаридов — в качестве покрывающих антигенов в ИФА для оценки уровня антител к неогликоконъюгатам.