蛍光イメージング革命第14回Mイルミネーターとは？

摘要

本連載第7回'働起光強度の絶対的尺度"（2004年5月号）で行った議論を振り返ってみたい．生きた細胞を使って定量的なイメージングを実践する際には，蛍光色素の礎色は極力避けなければならない．槌色の度合いは，励起光強度注1ぉよび励起のための照射時間に比例するとしよう．では，励起光強度×照射時間＝助起光量を一定にするとして，強い光を短く当てるか，それとも弱い光を長く当てるか，どちらが槌色を抑えながら良い蛍光シグナルが得られるのか．これは即答できない問題である注2．通常の全視野顕微鏡（wide－fieldmicroscopy）における励起光の作り方に関して一例を挙げる．75Wのキセノンランプの光から励起波長を選択すると同時に，NDフィルタ（減光フィルタ）で強度を1／20（5％）にまで落とし，励起時間は200msecに設定するとしよう．