タンパク質リン酸化修飾の高感度検出法と新しいオミクス技術としての展開

摘要

本稿では，リン酸基捕捉分子，Phos-tagを用いたリン酸化タンパク質の解析技術について述べる.Phos-tagのビオチン化誘導体は，リン酸化タンパク質の網羅的検出のためのウエスタンブロッティング，ペプチドアレイを用いた試料中のキナーゼ活性の高感度検出などに応用できる分子デバイスである.また，アクリルアミド化Phos-tagを共重合させたゲルを用いてタンパク質のリン酸化状態の違いを分離検出するリン酸親和性電気泳動法についても概説する.この手法は細胞内タンパク質の多様なリン酸化状態とその経時変動を定量解析することができる.リン酸化プロテオミクスの主流であるショットガン分析法においては，タンパク質のリン酸化修飾はペプチドとしての情報となるが，本法は全長タンパク質のリン酸化状態を解析しようとするものであり，オミクス技術に新しい視点をもたらす技術となる.