核移行糖転移酵素を用いた核内ルアセチルグルコサミン修飾タンパク質同定法の確立

摘要

はじめにタンパク質の翻訳後修飾の最も高度なものの一つが糖 鎖修飾である.細胞内の小胞体やゴルジ体内腔で様々 な糖転移酵素やグリコシダーゼが逐次作用して,高度な 糖造が作り出される.代表的なN型糖鎖とO型糖鎖はそれぞれ,AsnとSer/Thr側鎖のそれぞれアミド基と水 酸基に修飾される糖鎖である.これに加えて,2糖の繰り 返し構造をもつ長い一本鎖のグリコサミノグリカンも知ら れている.図1はW型糖鎖およびO型糖鎖の生合成過 程を示したものであるが,両者の生合成にはいくつかの特徴的な違いが存在する.第一に,N型糖鎖修飾は小胞 体およびゴルジ体で起こるのに対してO型糖鎖修飾は ゴルジ体のみで起こる点である.第二に,N型糖鎖は14 糖から成る大きな糖鎖が脂質中間体の上で合成された 後にオリゴ糖転移酵素によってペプチド鎖に転移される のに対し,O型糖鎖は1残基ずつ伸長してゆく過程をと る.第三に,N型糖鎖は14糖から成る共通の糖鎖が付加 された後に小さく分解され,新たな多様性をもった糖鎖 が作られるのに対し,O型糖鎖は逐次糖残基が修飾され 多様な構造を構築する流れになっている.すなわち,糖 鎖修飾と一言でいっても,糖鎖の種類によって生合成の.