При исследовании бифункциональное(tm) дестабилазы, эндо-ε-(γ-Glu)-Lys-изопептидазы, в качестве источника ее использовали секрет слюнных железмедицинской пиявки (Hirudo medicinalis). Поскольку секрет, получаемый известным способом, описанным Ригби и сотр. (1987), (секрет-К) не проявляет характерную для дестабилазы высокоспецифическую изопептидазную (Д-димер мономеризующую) активность, так как обладает разрушающей ее протеолитической активностью (субстрат G1р-Аlа-А1а-Leu-рNА), которая обусловлена примесями содержимого кишечного канала пиявки, нами был разработан новый способ получения истинного пиявочного секрета (секрет-И). Он отличается полным отсутствием содержимого кишечного канала пиявки и лишенпротеолитической активности. При фракционировании секрета-И с помощью НР LС гель-фильтрации через суперозу 5-12 впервые удалось разобщить характерные для дестабилазы Д-димер мономеризующую и лизоцимную активности. Разобщения этих активностей для очищенного препарата дестабилазы удалось достичь в результате обращенно-фазовой хроматографии в градиенте ацетонитрила (0-60%), содержащего 0,1% трифторацетата. Показано, что мономеризующая активность дестабилазы определяет способность секрета-И растворять стабилизированный фибрин путем изопептидолиза α-αи γ-γ цепей фибрина, соединенных ε -(γ-Glu)Lys изопептидными связями.
展开▼
