Получение моноПЭГилированного интерферона бета-1ачеловека: оптимизация условий N-концевого ПЭГилирования

摘要

В работе проведена модификация рекомбинантного интерферона (ИФН) бета-1а человека полиэтиленгликолем (ПЭГ). Реакцию проводили с использованием линейного активированного бутиральдегидного производного ПЭГ с молекулярной массой 30 кДа. В результате проведения многофакторного эксперимента выявлена зависимость выхода моноПЭГилированного белка от условий и определены оптимальные условия реакции. Разработана схема одностадийной хроматографической очистки, позволяющая получить коньюгат ПЭГ-ИФН бета-1а чистотой более 98%. Результаты масс-спектрометрических исследований показали, что очищенный коньюгат имеет молекулярную массу 54130 Да й является ПЭГилированным ИФН бета-1а, в котором N-концевой метионин связан с одной молекулой ПЭГ. Полученный ПЭГ--ИФН бета-1а обладает противовирусной активностью и может рассматриваться как перспективный кандидат при создании препарата пролонгированного действия для лечения рассеянного склероза.