RNA-guided Cas9 nucleaseを用いたゲノム編集法の効率およびoff-target効果の検討

摘要

ゲノム編集法（genome editing)は，遺伝病の治療や病態解析，タンパク•非コードRNA•ゲノム機能の解析に重要な技術である.これまでにZinc Finger Nuclease(ZFN),Transcnption activator-like effector nuclease(TALEN)などの方法が報告され，利用されてきた.両者とも，標的DNA配列認識ドメインとヌクレアーゼドメインからなるキメラタンパクを発現させ，標的配列近傍にゲノムDNA二本鎖断裂を起こさせる.この二本鎖断裂が修復されるときに，その修復機構を利用してゲノム塩基の欠失•挿入•置換などの編集を誘導することができる.しかし両者とも標的DNA配列認識ドメインの構築が煩雑であり，コスト的•時間的な点で汎用性がなかった.