SUPERVIVENCIA Y FORMACIÓN DE BIOPELÍCULAS DE VIBRIO CHOLERAE SOBRE QUITINA DE CAMARÓN

摘要

Vibrio cholerae biofilm formation is a phenomenon that influences the life cycle of this human pathogen and its ecological function in the environment. The present work aimed to evaluate the survival and biofilm formation of V. cholerae of clinical and environmental origins with natural chitin. Bacterial suspensions were inoculated in a medium without nutrients and nutritive broth with chitin obtained from shrimp exoskeleton, incubated at different pH and temperatures. In the survival assays, the isolates retained their capacity to form colonies for 31 days in starvation conditions and exposure to chitin as the only source of carbon and nitrogen. In environmental scanning electron microscopy of both microorganisms, bacterial adhesion to the chitin surface was observed, as well as extracellu- lar matrix and biofilm formation during 4-46h in the presence of nutrients. The environmental isolate at 25h had a biofilm architecture with pillars and channels, while the clinical one showed biofilms in less time, without formation of tridimensional structures. In both isolates, PCR detected the gene vpsR, reported for this bacterium in the formation of biofilm. These results demonstrate that V. cholerae isolated from humans and coastal marine waters are able to survive for prolonged periods in association with organisms having a chitin cover and to form biofilms. This research is a contribution to the understanding of environmental survival strategies of V. cholerae and the possible pathways for transmission to humans.%La formación de biopelículas de Vibrio cholerae es un fenómeno que influye en el ciclo de vida de este patógeno humano y en su función ecológica en el ambiente. En este trabajo se propuso evaluar la supervivencia y formación de biopelículas de aislados de V. cholerae de origen clínico y ambiental con quitina natural. Se inocularon suspensiones bacterianas en medio sin nutrientes y caldo nutritivo con quitina obtenida de exoesqueleto de camarón, incubados a diferentes pH y temperaturas. En los ensayos de supervivencia, los aislados mantuvieron la capacidad de formar colonias por 31 días en condiciones de inanición y exposición a quitina como única fuente de carbono y nitrógeno. En el estudio de microscopía electrónica de barrido en modo ambiental se observó adhesión bacteriana a la superficie de qui- tina, matriz extracelular y formación de biopelículas por 4-46h en presencia de nutrientes para ambos microorganismos. El aislado ambiental mostró en 25h arquitectura en las biopelículas con pilares y canales, mientras que el clínico presentó biopelículas en menor tiempo, sin formación de estructuras tridimensionales. En ambos aislados se detectó por PCR el gen vpsR, reportado para esta bacteria en la formación de biopelículas. Estos resultados muestran que V. cholerae aislado de humanos y aguas marino-costeras puede sobrevivir por periodos prolongados en asociación a organismos con cubierta de quitina y formar biopelículas. Esta investigación contribuye al conocimiento sobre las estrategias de supervivencia ambiental de V. cholerae y sus posibles vías de transmisión en humanos.