Zellfreie Eintopf-Synthese von natürlichem (+)-Nootkaton durch die Kombination einer dye-decolorizing Peroxidase mit einer Laccase aus Funalia trogii

摘要

Ein kombiniertes System aus einer dye-decolorizing Peroxidase (Ftr-DyP) und einer Laccase aus dem Ba-sidiomyceten Funalia trogii oxidierte ( + ) Valencen zu dem typisch nach Grapefruit-riechenden Aromastoff (-i-)-Nootkaton. Nach einer 24 stündigen Reaktionszeit und unter Zusatz von 1 mM Mn~(2+) (Cofaktor) und 2,5 mM p-Cumarsäure (Mediator) wurde mit einer hohen Selektivität > 1000 mg/L (+)-Nootkaton gebildet. Spuren an Nootkatolen und des Prekursors waren detektierbar. Die neue Ftr DyP wurde gereinigt, sequenziert und charakterisiert als ein thermostabiles, nicht-glycosidiertes Protein mit einem pH-Optimum im sauren Bereich und einer Molekularmasse von 52,3 kDa. Neben der typischen Aktivität von DyPs gegenüber Anthraquinon-Farben oxidierte die Ftr-DyP auch Mn~(2+) und zeigte Aktivität in Abwesenheit von Wasserstoffperoxid. Weder eine DyP aus Mycetinis scorodonius noch eine Manganperoxidase auch Nemato-loma frowardii konnten die Ftr-DyP in dieser Reaktion ersetzen.