Rabbit polyclonal antibody against Erns protein for the detection of Classical Swine Fever Virus

摘要

La peste porcina cl??sica (PPC) es una enfermedad end??mica en numerosos pa?-ses. Una herramienta clave para la confirmaci?3n en laboratorio de la PPC es el diagn?3stico diferencial entre cerdos vacunados y los que est??n realmente infectados. Muchos ensayos inmunoadsorbentes ligados a enzima (ELISA) est??n basados en la captura de anticuerpos en los sueros, pero estos ensayos no pueden utilizarse en aquellos animales que est??n persistentemente infectados. En tales casos, un ELISA de captura de ant?-geno podr?-a ser una buena elecci?3n para diferenciar los animales vacunados de aquellos que est??n infectados. Con el objetivo de producir un anticuerpo policlonal que permita esta t??cnica, se inmunizaron dos conejos con prote?-na Erns recombinante. El anticuerpo fue conjugado a peroxidasa de r??bano picante (HRP) y la diluci?3n ?3ptima de trabajo fue de 1:64 000 en un ELISA directo. Se evaluaron diferentes condiciones de recubrimiento para atrapar Erns recombinante en un ELISA y se concluy?3 que el recubrimiento a 10 μg/mL asegurar?-a mayor captura. En el ELISA se pudo detectar la Erns de una mezcla de sueros de cerdos vacunados con la cepa china del virus de la peste porcina cl??sica (VPPC). Adem??s, no se observ?3 reacci?3n en sueros de animales sanos ni con sueros de animales vacunados con Porvac??, vacuna de subunidad basada en la glicoprote?-na E2. Se concluy?3 que el anticuerpo policlonal generado puede reconocer la prote?-na Erns viral en sueros porcinos y que podr?-a ser utilizado en un ELISA s??ndwich para el diagn?3stico de la PPC, en aquellos animales persistentemente infectados o inmunodeprimidos.