Protocolo de rea??o em cadeia pela polimerase precedida de transcri??o reversa para a detec??o de vírus da raiva.

摘要

Este estudo teve por objetivo implantar um protocolo de amplifica??o gen?mica, precedida de transcri??o reversa (RT-PCR) para o gene da nucleoproteína do vírus da raiva, para a utiliza??o dessa metodologia em laboratórios onde s?o realizadas investiga??es para a detec??o do vírus rábico. Foram utilizadas 50 amostras de tecido encefálico de animais (44 bovinos, 5 eqüinos e 1 quiróptero) oriundos do Estado do Rio de Janeiro, positivos por imunofluorescência direta e/ou prova biológica para o vírus rábico. A extra??o do RNA foi feita a partir da suspens?o a 10% em PBS pH7,2 do tecido encefálico utilizando-se a metodologia de TRIzolTM (Life Technologies) e o protocolo de RT-PCR descrito por Heaton et al. (1997), incluindo algumas modifica??es. Dentre as 50 amostras analisadas, 50 foram positivas pela prova biológica e pela RT-PCR e destas, 49 foram positivas pela imunofluorescência direta. Estes resultados demonstram ser este protocolo de RT-PCR uma metodologia sensível, específica, rápida e extremamente valiosa, podendo ser utilizada como rotina em laboratórios que trabalham no diagnóstico de vírus rábico.