D-变异体的分析——附1例报告

摘要

目的 分析1例D--变异体的分子背景.方法 分别采用血清学方法和序列特异性引物PCR (PCR-SSP)方法检测标本RhD、C、c、E、e抗原和RHCE基因,同时序列分析RHAG、RHCE基因全长编码区序列,最后进行RHD合子型分析和家系分析.结果 先证者血清学测定Rh表型为D--,PCR-SSP结果为DC-;RHAG第1-10外显子测序显示,编码区与GenBank NC-000006标准序列一致,未观察到形成Oldeide和Duclos-Like抗原的碱基变异,亦未见形成高频抗原Duclos(RHAG1)的RHAG316C＞G突变,所有序列均未见杂合峰;RHCE基因第1-10外显子扩增显示,缺失第3-5外显子,其余外显子序列与标准序列一致,分析第1、2外显子序列为RHC,提示该等位基因为RHCE(e)-D(3-5)-CE(e);家系分析其父母、弟弟的RHAG序列与先证者完全一致,父母Rh血清学表型分别为DCCee和Dc-cEE,其父亲的PCR-SSP和测序结果一致,其母亲PCR-SSP结果DCcEE与测序结果一致,而与血清学结果不符(Dc-cEE),其弟血清学表型、PCR-SSP和测序结果,均与先证者一致,结合RHD合子型分析结果,该家系父母分别为DCe/DC-和DcE/DC-基因型,先证者和弟弟为DC-/DC-.结论 RHCE-D(3-5)-CE等位基因形成D--表型并稳定遗传.