乌附经方预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

摘要

目的 观察含乌头、附子、半夏、栝楼的乌附经方对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用,探讨含有十八反药物的方剂用于特定病理状态的可行性.方法 雄性Wistar大鼠50只随机分为5组,即:假手术对照组(SH组)、心肌缺血再灌注模型对照组(I/R组)、乌附经方低剂量组(I/R+JFL组)、乌附经方中剂量组(I/R+JFM组)及乌附经方高剂量组(I/R+JFH组),每组10只.乌附经方低、中、高剂量组分别以0.75、1.50、3.00 mL/100 9体质量的剂量灌胃14天,浓度500 g/L;除SH组外,其他各组结扎冠状动脉左前降支,使心肌缺血30 min,再灌注120 min.透射电镜观察心肌线粒体的超微结构改变；一步法脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测各组缺血心肌细胞凋亡；RT-PCR法测B细胞白血病/淋巴瘤-2基因(B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2)、与Bcl-2相关的x蛋白(Bcl-2 associated x protein,Bax)的mRNA表达；ELISA检测血清乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)活性,并测定心肌梗死面积的大小.结果 与I/R组比较,乌附经方各组均能降低血清中LDH、CK的释放量(且随着剂量的增加LDH、CK的释放量递减),减小心肌梗死面积、降低凋亡指数(P＜0.05)；经方组凋亡基因Bcl-2表达水平上升,Bax表达水平下降,Bcl-2/Bax比值升高.结论 乌附经方预处理可能通过减少细胞凋亡,对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用.说明“十八反”不是绝对的,而是相对的,含有相反中药的复方制剂可用于缺血性心肌病等特定的病理状态.