Profile of antimicrobial resistance and detection of iss gene by the polymerase chain reaction in the typification of pathogenic Escherichia coli in meat type quails under sanitary inspection

摘要

The pathogenicity of Escherichia coli strains is partially related to the expression of virulence factors genes, present in genetic elements called plasmids. APEC strains responsible for diseases in birds may present the iss gene which increases the resistance of E. coli strains to the lityc effect of the host's serum, besides resistance to several antimicrobials. This study was conduced in order to detect E. coli in tracheae of meat-type quails and to evaluate, by the presence of the iss gene and the profile of antimicrobial susceptibility, the pathogenic potential of the isolated samples for birds and humans. One hundred and eighty tracheae of quails were collected for detection of E. coli, antimicrobial sensitivity tests, and for polymerase chain reaction (PCR), for detection of iss gene. From the examined quails, 8.9 % (16/180) were positive for E. coli, from which 20 strains of this bacterium were obtained. Most of them were resistant to Tetracycline (16/20), followed by Ceftadizime (13/20) and Nalidixic-acid (12/20) and only one isolate was resistant to Amoxicillin. The detection of iss gene occurred in 55% (11/20) of the isolates, indicating that these strains had the potential to be pathogenic not only for quails, but also for other kinds of birds, other animals and even human beings that would be in contact with these E. coli isolates. Index terms: Coturnix, Escherichia coli, gene iss.     INTRODUÇÃO Nas aves, doenças causadas por Escherichia coli têm caráter extraintestinal, com a infecção geralmente se iniciando no epitélio traqueal (Vidotto et al. 1997). Agentes responsáveis por doenças respiratórias comumente causam aerossaculites, que são responsáveis pela elevação da taxa de condenação de carcaças. Além disso, a presença de aerossaculite exerce um impacto negativo no peso final das aves destinadas ao abate, causando desuniformidade dos lotes. Essa desuniformidade contribui para o aumento das falhas durante o processamento, principalmente durante a evisceração, elevando o risco de contaminação das carcaças com patógenos do trato intestinal (Russel 2003). Cepas de E. coli patogênicas para aves (Avian Pathogenic E. coli, APEC) podem apresentar aumento de resistência aos efeitos líticos do soro (increased serum survival -iss), sendo esta característica determinada por gene plasmidial (Silveira et al. 1994, Ewers et al. 2007). Embora Silveira et al. (1994) e Fantinatti et al. (1994) tenham demonstrado que a presença per se do plasmídio, contendo o gene iss, não é suficiente para determinar a capacidade patogênica de uma cepa de E.coli, este gene pode ser considerado como marcador de virulência, pois, comparado a outros fatores de virulência, o gene iss é citado como o mais prevalente em cepas oriundas de aves doentes (Gibbs et al. 2003, Ozawa et al 2008, Rocha et al. 2008). Comparando a presença do gene iss entre aves com manifestações relacionadas à colibacilose e aves saudáveis, o gene iss é mais prevalente nas aves doentes (McPeake et al. 2005, Nolan et al. 2002). Esse mesmo gene pode ser encontrado com freqüência em cepas extraintestinais (Extraintestinal Pathogenic E. coli, ExPEC) isoladas de fontes humanas (Fernandez-Bero et al. 1990, Ewers et al. 2007) e codifica a produção da proteína Iss, que exerce seu efeito anticomplemento inativando o complexo de ataque à membrana bacteriana (Waters & Crosa 1991). Cepas do patotipo ExPEC também foram isoladas de alimentos crus, carne bovina e carne de aves, indicando que essas cepas representam uma nova classe de patógenos transmissíveis por alimentos (Smith et al. 2007). O gene iss foi localizado em vários plasmídios conjugativos de alto peso molecular capazes de carrear, simultaneamente, fatores de virulência e de resistência a antimicrobianos (Doetkott et al. 1996). Através da conjugação, bactérias comensais, inclusive de espécies diferentes, podem se tornar mais patogênicas e resistentes (Gomes et al. 1991, Skyberg et al. 2003). Johnson et al. (2002) localizaram, em uma cepa de E. coli do patotipo APEC, um plasmídio R de 101 kilobases (kb) que codificava, além do gene iss, a resistência a oito grupos de agentes antimicrobianos (tetraciclina, sulfonamidas, aminoglicosídeos, trimetoprim e agentes beta-lactâmicos), metais pesados, como o nitrato de prata, e a dois desinfetantes (composto quaternário de amônia e cloreto de benzalcônio). Tivendale et al. (2004) descreveram a presença do gene iss em um plasmídio denominado de pMV01 (