Experimental pneumonic mannheimiosis in calves: nasal and nasopharingeal swabs for diagnostic

摘要

An experimental model of bovine pneumonic mannheimiosis (BPM) was used to evaluate the nasal and nasopharynx bacterial species of calves during the course of the disease and for checking the diagnostic efficiency of nasal swab (NS) and nasopharingeal swab (NPS) microbiological exams. A total of 28 calves were randomized into four experimental groups (G1-G4). NS and NPS were obtained 7 days before and 12 (G1), 24 (G2), 48 (G3) e 72 (G4) hours after intrabronchial inoculation of Mannheimia haemolytica. After the induction of BPM, M. haemolytica biotype A was the predominant isolated bacterium in NS and NPS in all evaluated sampling times, except for one NS (harvested 24 hours). There were no significant statistical differences for the rates of Pasteurella multocida isolation in NS and NPS, harvested before and after the induction of BPM. However, this bacterium was isolated more frequently after the induction of BPM, mainly in NPS. Therefore, the microbiological NS and NPS exams were important auxiliary tests for diagnosing BPM. Index terms: Bacterial flora, upper airway, respiratory diseases, bovine, Mannheimia haemolytica.     INTRODUÇÃO O complexo das doenças respiratórias bovinas é considerado um importante problema de sanidade animal, pois sua etiologia multifatorial, envolvendo fatores ambientais, condições de manejo e agentes infecciosos (Smith 2001, Radostits et al. 2002, Gagea et al. 2006), acarretam grandes perdas econômicas (Esslemont & Kossaibati 1999, Virtala et al. 1999). Segundo Magwood et al. (1969) a flora bacteriana das vias aéreas anteriores (VAA) de bezerros pode ser classificada em flora basal, amplamente distribuída na população de bezerros; flora suplementar, composta de espécies capazes de colonizar a mucosa nasal e a flora transitória, considerada originária do ambiente e que, em geral, é incapaz de colonizar a mucosa nasal. Diferentes sorotipos de Mannheimia haemolytica são considerados comensais das VAA de bovinos sadios (Magwood et al. 1969, Woldehiwet et al. 1990), entretanto, em geral, são encontrados apenas em pequenas quantidades (Panciera & Corstvet 1984, Catry et al. 2005) e por curtos períodos de tempo, na maioria das vezes inferiores a um dia (Frank et al. 1986). O sorotipo A1 é encontrado em menor quantidade que o A2, que é o sorotipo mais freqüentemente isolado das VAA de bovinos sadios (Frank & Wessman 1978). A quantidade de M. haemolytica A1 e Pasteurella multocida presente nos swabs nasais (SN) de bovinos com mannheimiose pulmonar aguda é bem mais elevada que aquela recuperada de animais sadios (Jaramillo-Arango et al. 2008). M. haemolytica A1 se prolifera mais intensamente nas VAA de bovinos com mannheimiose pulmonar em comparação a animais sadios, tornando-os mais propensos a inalar maiores quantidades desta bactéria (Al-Ghamdi et al. 2000, Jaramillo-Arango et al. 2008). M. haemolytica A1 não é apenas o agente infeccioso mais freqüentemente isolado de bovinos com mannheimiose pulmonar natural, mas a causa primária dos eventos patológicos que caracterizam esta doença clínica como uma broncopneumonia fibrinosa lobar aguda (Welsh et al. 2004, Gagea et al. 2006, Katsuda et al. 2007, Rice et al. 2007). Quando se utilizam procedimentos onde M. haemolytica A1 é depositada diretamente nos pulmões, os fatores que causam estresses físicos ou infecciosos, que têm a função de suprimir os mecanismos de defesa das VAA, não são mais necessários para o desenvolvimento da enfermidade, o que torna estas técnicas mais vantajosas e úteis em pesquisas sobre a mannheimiose pneumônica bovina (MPB) (Fagliari 2003, Silva 2005, Lubbers et al. 2007, Srikumaran et al. 2007). Experimentalmente a infusão intrabronquial de 5 x 109 unidades formadoras de colônia (UFCs) de M. haemolytica A1 produz quadro clínico agudo, com evolução para coma irreversível dentro de 24 horas após a inoculação (Fagliari 2003). Contudo, McClenahan et al. (2000) e Silva (2005) reproduziram um quadro típico de mannheimiose pneumônica ao inocular, respectivamente, 1x109 e 1x1010 UFCs via intrabronquial em bezerros. Um modelo experimental de MPB foi utilizado neste trabalho com objetivo de avaliar a flora bacteriana das cavidades nasal e nasofaringeana dos bezerros antes e após a indução da MPB, bem como verificar a eficiência dos SN e SNF com fins de diagnóstico da doença.   MATERIAL E MÉTODOS Animais e grupos experimentais Utilizaram-se 28 bezerros da raça Holandesa, machos, com três a sete dias de idade, oriundos de fazendas de produção de leit