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【24h】

Detec??o dos genes codificantes da toxina CDT, e pesquisa de fatores que influenciam na produ??o de hemolisinas em amostras de Campylobacter jejuni de origem avícola

机译:检测家禽源空肠弯曲菌样品中编码CDT毒素的基因以及影响溶血素产生的因素

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摘要

Resumo: Membros termofílicos do gênero Campylobacter s?o reconhecidos como importantes enteropatógenos para o ser humano e animais. A grande diversidade ecológica destes micro-organismos em diferentes habitats tais como água, animais e alimentos predisp?em ao aparecimento de novos fatores de virulência. Este trabalho teve por objetivo detectar os genes codificantes da Toxina Distensiva Citoletal (CDT) por meio da técnica de PCR, pesquisar a atividade de hemolisinas e a influência de solu??es quelantes e de íons nesta atividade. Foram utilizadas 45 amostras de Campylobacter jejuni de origem avícola para pesquisa de atividade hemolítica, cultivadas em Caldo Triptona de Soja (TSB). Após o crescimento bacteriano, as amostras foram semeadas em ágar tríptico de soja (TSA) contendo 5% de sangue de ovino. Para verificar a influência de agentes quelantes e solu??o de íons na atividade hemolítica, as amostras de C. jejuni foram cultivadas em TSB contendo separadamente os quelantes EDTA, ácido acético, solu??es de íons CaCl2, MgCl2 e FeCl3, em atmosfera de microaerofilia. Quanto à atividade de hemolisina de C. jejuni em placas de TSA - sangue ovino foi possível observar que houve hemólise em 40% das amostras analisadas apenas com caldo TSB. Somente o ácido acético apresentou a??o quelante sobre a atividade de hemolisinas em amostras de C. jejuni semeadas em placas de TSA - sangue ovino. Para detec??o dos genes cdtA, cdtB e cdtC através da técnica da Rea??o em Cadeia da Polimerase (PCR) foram utilizadas 119 amostras de C. jejuni de origem avícola. Foi possível observar que 37,8% possuíam o perfil de genes cdtABC. Os resultados demonstraram em amostras avícolas a presen?a de cepas de C. jejuni com potencial virulento, devido à presen?a dos genes da toxina CDT e potencial hemolítico, que apresentou a??o reduzida in vitro com ácido acético.
机译:摘要:弯曲杆菌属的嗜热成员被认为是人类和动物的重要肠病原体。这些微生物在不同生境(如水,动物和食物)中的巨大生态多样性导致出现了新的毒力因子。这项工作旨在通过PCR技术检测编码糖皮质激素的广泛扩散毒素(CDT)的基因,以研究溶血素的活性以及螯合溶液和离子对该活性的影响。用家禽来源的空肠弯曲杆菌的45个样品研究了在大豆曲普顿肉汤(TSB)中生长的溶血活性。细菌生长后,将样品接种到含有5%羊血的大豆三联琼脂(TSA)上。为了检查螯合剂和离子溶液对溶血活性的影响,空肠弯曲杆菌样品在TSB中生长,其中分别含有螯合剂EDTA,乙酸,CaCl2,MgCl2和FeCl3离子溶液。微需氧量气氛。关于TSA平板-绵羊血液中空肠弯曲杆菌溶血素的活性,有可能观察到40%仅使用TSB肉汤分析的样品中存在溶血现象。在TSA-绵羊血液板中播种的空肠弯曲杆菌样品中,只有乙酸显示出对溶血素活性的螯合作用。为了使用聚合酶链反应(PCR)技术检测cdtA,cdtB和cdtC基因,使用了119种来自家禽的空肠弯曲杆菌样品。可以观察到37.8%的人具有cdtABC基因谱。结果表明,由于毒素CDT基因和溶血潜力的存在,家禽样品中存在具有潜在毒性的空肠弯曲杆菌菌株,这表明在体外乙酸作用减弱。

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