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Protocolo de extracción de DNA por salting-out para peque?os volúmenes de sangre

机译:盐析DNA提取方案可用于少量血液

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摘要

Se desarrolló un protocolo modificado de extracción de DNA por salting-out a partir de muestras de sangre con volúmenes decrecientes (300; 100; 50; 25; 10; 5; 2,5; 1 y 0,5 μL). Se llevó a cabo posteriormente una amplificación de un fragmento de 345 pb del gen de la protrombina y de un marcador STR (short tandem repeat) utilizado comúnmente para estudios de filiación, mediante la reacción en cadena de la polimerasa, visualizándose los amplicones en un gel de poliacrilamida al 6,4 %. En todos los casos, la reacción de amplificación fue exitosa, demostrando así que el protocolo de extracción desarrollado permite obtener DNA en condiciones de pureza y cantidad suficiente a partir de peque?os volúmenes de sangre. De este modo, puede disminuirse la cantidad de muestra necesaria para realizar un estudio molecular, lo cual es fundamental en áreas como la genética forense donde la cantidad de muestra disponible puede ser limitada.
机译:从体积减小(300、100、50、25、10、5、2.5、1和0.5μL)的血液样品中开发了通过盐析提取DNA的改良方案。随后通过聚合酶链反应扩增凝血酶原基因的345 bp片段和通常用于筛选研究的STR标记(短串联重复序列),将凝胶上的扩增子可视化6.4%聚丙烯酰胺。在所有情况下,扩增反应都是成功的,因此证明了开发的提取方案可以从少量血液中获得纯度和足够量的DNA。这样,可以减少进行分子研究所需的样品量,这在诸如法医遗传学等可能限制可用样品量的领域至关重要。

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