Obtenci贸n, caracterizaci贸n de ant铆genos y evaluaci贸n de la t茅cnica de inmunotransferencia para la detecci贸n de candidiasis sist茅mica

摘要

Se evaluó un medio de cultivo que contenía peptona, glucosa, extracto de levadura y suero para favorecer el desarrollo de la fase micelial en Candida albicans y se comparó con el medio comercial TC 199; no se encontró diferencia significativa entre ellos. Se obtuvieron antígenos somáticos de la fase levaduriforme y micelial, que se caracterizaron por PAGE-SDS; en ambos antígenos se expresaron las proteínas reportadas como de alto valor diagnóstico. Mediante inmunotransferencia, se determinó que las proteínas antigénicas predominantes en la fase micelial tenían pesos moleculares de 19, 21, 27 y 58 kDa. Se estandarizó la inmunotransferencia, para la detección de anticuerpos en pacientes con candidiasis sistémica, por esta técnica se evaluaron 24 sueros positivos y fue comparada con la técnica ELISA, que resultó ser más sensible y menos específica. Las proteínas más reconocidas fueron las de 136 y 21 kDa y el complejo de 42 a 45 kDa. Descriptores DeCS: ANTIGENOS; TEST DE ELISA/métodos; CANDIDA ALBICANS; MEDIOS DE CULTIVO. La candidiasis sistémica ocupa hoy día uno de los primeros lugares en la micología médica y las enfermedades infecciosas.1 Su frecuencia ha aumentado en la última década, en muchos casos se observan cuadros clínicos de extrema gravedad en los que un diagnóstico tardío puede significar un desenlace fatal.2,3 El diagnóstico de las candidiasis profundas es extremadamente difícil, por la no existencia de signos clínicos específicos de la enfermedad, además el acceso a focos profundos donde se pueda aislar y evidenciar la levadura es prácticamente imposible por métodos no agresivos.4 Por estos motivos en los últimos años se ha trabajado en la búsqueda de métodos diagnósticos rápidos fundamentalmente serológicos, que faciliten el diagnóstico de la enfermedad, y además den una orientación rápida al clínico para poder instaurar el tratamiento adecuado, pues los métodos tradicionales de cultivos demoran como mínimo 7 d. En el presente trabajo se propusieron los objetivos siguientes: Evaluación de un medio de cultivo para el desarrollo de la fase micelial de C. albicans. Preparación de antígenos somáticos en fase levaduriforme y micelial de C. albicans, determinación de las proteínas específicas de cada fase, el montaje y optimización de inmunotransferencia y su comparación con la prueba ELISA para la detección de anticuerpos en pacientes con candidiasis sistémica, con la utilización del antígeno seleccionado. MÉ