A??o do soro de cabra anti-soro de coelho imunizado ou n?o com células linfóides do doador sobre o alotransplante cardíaco em ratos: immunosupression of goat antiserum against rabbit serum immunized or not with donor lymphoid cells

摘要

INTRODU??O: A rejei??o imunológica é uma das principais causas da perda de órg?os transplantados. A tentativa do controle da rea??o imunológica é clinicamente feita através da imunossupress?o inespecífica e experimentalmente também por bloqueio específico. O alotransplante cardíaco em ratos pela técnica de ONO,K é um bom método para avalia??o clínica da rejei??o e de estudos voltados para o controle da rejei??o. Objetivo : estudar o efeito de um anti-antisoro linfocitário, anti-linfócitos do doador sobre a rejei??o do alotransplante cardíaco de ratos Wistar para ratos Holtzman. MéTODOS: o soro anti-linfocitário (SAL) foi obtido através da imuniza??o de coelhos com linfócitos obtidos de ganglios linfáticos da cadeia mesentérica de ratos Wistar, em solu??o de Tyrode, contendo 3x10(9) células/ ml. A inocula??o de 3 coelhos foi feita com 1 ml da suspens?o celular e 1 ml de adjuvante completo de Freund. Duas semanas após a primeira inocula??o fez-se 4 doses semanais de refor?o. Os coelhos foram sangrados na 5a semana, quando ent?o foram separados os soros. A titula??o dos soros foi realizada pelo teste de citotoxicidade, sendo verificado que ambos apresentaram título de 1:1024. A dosagem de proteínas mostrou albumina com 3,1 e 2,7 g% e globulinas com 3,5 e 2,9 g%, sendo o normal 3,7 e 2,2 g% respectivamente. Os dois SAL foram misturados. Duas cabras foram inoculados, com 3 ml da mistura desses SAL, associados a 2 ml de adjuvante de Freund. As doses de refor?o com 5 ml do SAL foram iniciadas 2 semanas após. A cabra A recebeu 8 doses (1,4 g de globulinas). A cabra B recebeu 4 doses de refor?o (0,7 g de globulinas). Uma semana após a última inocula??o retirou-se 125 ml de sangue de cada cabra, fazendo a separa??o dos anti-soro anti-SAL (ASAL). Uma terceira cabra C foi imunizada com soro normal de coelho. A determina??o de precipitinas foi feita pelo método de OUCHTERLONY. O ASAL A teve título de 1:64 e B e C título de 1:128. Os ASAL A e B foram capazes de bloquear "in vitro" a atividade citotóxica do SAL até a dilui??o de 1:2 do SAL. O soro de cabra anti-soro normal de coelho (SCANC) n?o foi capaz de bloquear a citotoxicidade do SAL. Os animais submetidos a transplante cardíaco foram divididos em 2 grupos controles um normal com 10 ratos (C1) e outro (C2) com 5 ratos que recebeu 1,0 ml endovenoso de SCANC. O grupo de ratos testes A foi composto por 19 ratos distribuídos em 3 subgrupos. Subgrupo A1 com 5 ratos recebeu 0,5 ml do ASAL A, via endovenosa, logo após a cirurgia,o subgrupo A2 com 7 ratos recebeu 1.0 ml do ASAL A nas mesmas condi??es e o subgrupo A3 também com 7 ratos recebeu 1,0 ml no dia da cirurgia e 1,0 ml nos outros 2 dias consecutivos. O grupo de ratos testes B que recebeu o ASAL B foi igual ao grupo A. A avalia??o dos cora??es transplantados foi diária através da palpa??o abdominal. O tempo máximo de seguimento foi de 243 dias. Os cora??es considerados rejeitados foram retirados e feito estudos histológicos. RESULTADOS: o período de rejei??o dos grupos foi : controles C1 e C2 foram 11,9 e 14,6 dias, respectivamente; no subgrupo A1 apenas um rato teve sobrevida cardíaca significante (153 dias), nos demais ela variou de 9 a 15 dias; no subgrupo A2 a sobrevida do cora??o foi significante e variou de 23 a 230 dias; no subgrupo A3 apenas 5 cora??es tiveram sobrevida significante que variou de 29 a 190 dias. A sobrevida dos cora??es transplantados do grupo B foi significante para um animal de cada subgrupo (120,132 e 129 dias). Os cora??es com sobrevida longa foram retirados batendo. Os demais cora??es foram rejeitados dentro do período de varia??o dos grupos controles. CONCLUS?ES: O soro de cabra anti-soro anti-linfócitos do doador, com maior período de imuniza??o, foi capaz de bloquear a resposta imune de rejei??o dos cora??es transplantados nas doses de 1,0 e 3,0 ml. Os ratos que n?o promoveram a rejei??o aguda dos cora??es transplantados n?o apresentaram anticorpos citotóxicos circulantes. O fator causador do bloqueio parace n?o estar vinculado aos bloqueios de citotoxicidade "in vitro" e do teor de precepitinas do SAL.