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【24h】

Uso de las Propiedades Fisicoquímicas de Oligonucleótidos como Biomarcadores

机译:寡核苷酸的理化性质作为生物标志物的用途

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摘要

Marcadores biológicos (biomarcadores) son complejos moleculares que pueden estar presentes en fósiles, procedentes de biomoléculas de los organismos vivos. Debido a sus características generales son resistentes a la intemperie, la biodegradación, la evaporación y otros procesos biológicos, siendo comúnmente conservados en las rocas y pueden ser utilizados por geólogos, geoquímicos, arqueólogos, etc. para obtener información sobre la materia orgánica en las rocas fuente, la presencia de petróleo, las condiciones ambientales durante su sedimentación (diagénesis), la madurez térmica experimentada por el petróleo y/o roca (catagénesis), el grado de biodegradación, algunos aspectos de la mineralogía de la roca fuente (litología), la edad de los fósiles y en caracterización de DNA (Acido Desoxirribonucleico). Los biomarcadores pueden ser oligonucleótidos, que son fragmentos de moléculas de DNA de cadena sencilla de determinada longitud. El DNA de fósiles puede formar enlaces cruzados entre si o con otras moléculas al paso del tiempo, dificultando el uso de técnicas como el PCR para su estudio, por ello, en el presente trabajo se aplicó a los oligonucleótidos la técnica de determinación de los valores de pKa (potencial de la constante de ionización), mediante espectrofotometría de luz ultravioleta en el intervalo básico de pH, usando como oligonucleótido modelo el d-AAAGAAA en solución acuosa de NaCl, titulándolo con solución de NaOH. Lo anterior también se realizo en presencia de una solución amortiguadora de pH (NaHCO3). Además se determinaron valores de pKa para el mismo compuesto a diferentes condiciones de temperatura, sales y mezclas de alcohol-agua como solvente. También se determinaron valores de pKa a los oligonucleótidos d-CCCGCCC y d-AAGAA. Los valores de pKa obtenidos varían entre 9 y 12. Estos resultados obtenidos son un aporte al conocimiento de las propiedades físicas de los oligonucleótidos, estos datos pueden ser especialmente útiles en el mencionado caso de dificultad para el uso de otras técnicas como el PCR para la caracterización e interpretación de los oligonucleótidos como biomarcadores.
机译:生物标志物(生物标志物)是化石中可能存在的分子复合物,起源于活生物体的生物分子。由于它们的一般特性,它们耐风化,生物降解,蒸发和其他生物过程,通常保存在岩石中,可被地质学家,地球化学家,考古学家等使用。获取有关烃源岩中有机物,油的存在,沉积过程中的环境条件(成岩作用),油和/或岩石经历的热成熟度(催化作用),生物降解程度,原始岩石的矿物学(岩性),化石的年龄和DNA的表征(脱氧核糖核酸)。生物标记可以是寡核苷酸,其是一定长度的单链DNA分子的片段。化石DNA可以随着时间的流逝彼此或与其他分子形成交联,使得难以使用PCR等技术进行研究,因此,在本工作中,将测定值的技术应用于寡核苷酸。在碱性pH范围内,通过紫外分光光度法测定pKa(电离常数的电势),使用d-AAAGAAA在NaCl水溶液中作为模型寡核苷酸,并用NaOH溶液滴定。这也在pH缓冲溶液(NaHCO3)的存在下进行。此外,在不同温度条件下,以盐和乙醇-水混合物为溶剂,测定了同一化合物的pKa值。还确定了寡核苷酸d-CCCGCCC和d-AAGAA的pKa值。获得的pKa值在9到12之间变化。这些结果有助于了解寡核苷酸的物理性质。这些数据在上述难以使用其他技术(例如PCR)的情况下特别有用表征和解释寡核苷酸作为生物标记。

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