Solid-phase assays for small molecule screening using sol-gel entrapped proteins

摘要

Avec la disponibilite´ de banques de comprenant plus d’un million de compose´s, il est devenu crucial de criblernrapidement et effectivement ces compose´s sur des cibles pharmaceutiques. Les essais en phase solide offrent plusieursnavantages par rapport aux me´thodes en solution, et comme un plus haut degre´ de miniaturisation peut eˆtre atteint en phasensolide, des e´tudes fonctionnelles et base´es sur l’affinite´ sont possibles et diverses me´thodes de de´tection peuvent eˆtre utilisen´e. Malheureusement, la plupart de me´thodes d’immobilisation de prote´ines sont soit trop dures, soit qu’elles requie`rentndes prote´ines recombinantes et ne peuvent donc accommoder des prote´ines fragiles comme les kinases ou les re´cepteursnlie´s a` la membrane. L’encapsulation de prote´ines par un proce´de´ sol-gel sur une matrice inorganique de silice se de´gagencomme nouvelle plateforme d’essais en phase solide. Dans cet article de revue, nous discutons du de´veloppement de micropucesnde prote´ines a` partir proce´de´s sol-gel et de colonnes monolithiques d’affinite´ biologique base´es sur les proce´de´snsol-gel dans un contexte de criblage a` haut de´bit de banques et de me´langes de petites mole´cules.%With compound libraries exceeding one million compounds, the ability to quickly and effectively screen these compounds against relevant pharmaceutical targets has become crucial. Solid-phase assays present several advantages over solution-based methods. For example, a higher degree of miniaturization can be achieved, functional- and affinity-based studies are possible, and a variety of detection methods can be used. Unfortunately, most protein immobilization methods are either too harsh or require recombinant proteins and thus are not amenable to delicate proteins such as kinases and membrane-bound receptors. Sol-gel encapsulation of proteins in an inorganic silica matrix has emerged as a novel solid-phase assay platform. In this minireview, we discuss the development of sol-gel derived protein microarrays and sol-gel based monolithic bioaffinity columns for the high-throughput screening of small molecule libraries and mixtures.