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CRISPR-Cas-Induced Mutants Identify a Requirement for dSTIM in Larval Dopaminergic Cells of Drosophila melanogaster

机译:CRISPR-Cas诱导的突变体确定果蝇幼虫多巴胺能细胞中dSTIM的需求

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摘要

Molecular components of store-operated calcium entry have been identified in the recent past and consist of the endoplasmic reticulum (ER) membrane-resident calcium sensor STIM and the plasma membrane-localized calcium channel Orai. The physiological function of STIM and Orai is best defined in vertebrate immune cells. However, genetic studies with RNAi strains in Drosophila suggest a role in neuronal development and function. We generated a CRISPR-Cas-mediated deletion for the gene encoding STIM in Drosophila (dSTIM), which we demonstrate is larval lethal. To study STIM function in neurons, we merged the CRISPR-Cas9 method with the UAS-GAL4 system to generate either tissue- or cell type-specific inducible STIM knockouts (KOs). Our data identify an essential role for STIM in larval dopaminergic cells. The molecular basis for this cell-specific requirement needs further investigation.
机译:储库操作钙进入的分子成分已在最近被鉴定出来,包括内质网(ER)膜驻留钙传感器STIM和质膜局部钙通道Orai。 STIM和Orai的生理功能在脊椎动物免疫细胞中得到最好的定义。但是,对果蝇中的RNAi菌株进行的遗传研究表明,它在神经元发育和功能中起作用。我们为果蝇中编码STIM的基因(dSTIM)产生了CRISPR-Cas介导的缺失,我们证明了它是幼虫致死的。为了研究神经元中STIM的功能,我们将CRISPR-Cas9方法与UAS-GAL4系统合并,以产生组织或细胞类型特异性的诱导性STIM敲除(KOs)。我们的数据确定了STIM在幼虫多巴胺能细胞中的重要作用。此细胞特定要求的分子基础需要进一步研究。

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