稳定表达HIV-1辅助蛋白Rev的THP-1细胞模型的建立和鉴定

摘要

Human immunodeficiency virus-1(HIV-1)辅助蛋白在其感染和艾滋病发病过程中起着非常重要的作用。Regulator of expression of virion proteins(Rev)作为HIV-1辅助蛋白之一,可以调节病毒结构蛋白mRNA出核转运和蛋白表达,对于病毒的复制至关重要。为研究Rev蛋白对靶细胞表型和功能的影响,本实验采用电穿孔的方法,将HIV-1的rev基因导入THP-1细胞,通过流式分选结合G418筛选的方法建立稳定表达Rev蛋白的细胞模型;并通过RT-PCR、荧光观察及流式检测的方法,在mRNA和蛋白两个水平对所建立的细胞模型进行鉴定。结果证实rev基因成功导入了THP-1细胞并稳定表达,为后续rev基因产物与细胞相互作用的研究提供了平台。