SLPI在卵巢癌发生、发展中的作用和机制研究

摘要

目的 探讨分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)在卵巢癌发生、发展中的作用及可能的作用机制.方法 采用qRT-PCR法检测不同卵巢癌细胞系(SKOV-3、OVCAR-3、TOV-21G、A2780、OV-1063)中SLPI的表达.利用干扰质粒及过表达质粒构建不同SLPI表达水平的卵巢癌SKOV-3细胞系稳转细胞株,分为shScr组(感染shScr病毒,为敲低对照株)、shSLPI组(感染shSLPI病毒,为SLPI敲低株)、Vector组(感染Vector病毒,为SLPI过表达株对照)、SLPI组(感染SLPI病毒,为SLPI过表达株).CCK-8法、Transwell小室和流式细胞仪分别检测各组细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡变化;Western blot法检测各组细胞增殖、凋亡及迁移侵袭相关蛋白表达水平;裸鼠皮下移植瘤实验比较各组细胞皮下移植瘤生长情况.结果 与正常卵巢上皮IOSE80细胞相比,各卵巢癌细胞系中SLPI mRNA表达水平均明显升高(均P<0.05).与shScr组比较,shSLPI组细胞增殖能力明显减弱,侵袭迁移细胞数目减少,且细胞凋亡率明显升高,体内移植瘤的生长也明显减慢(均P<0.05);Western blot结果显示shSLPI明显降低了增殖相关细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白1(Cyclin D1)以及抗凋亡相关B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL2)蛋白的表达,而促进了促凋亡相关半胱天冬酶3(Cleaved Caspase-3)/半胱天冬酶9(Cleaved Caspase-9)、BCL2相关X蛋白(BAX)表达;另发现shSLPI组细胞迁移及侵袭相关基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、锌指蛋白SNAIL1(Snail 1)和锌指转录因子(Slug)表达明显降低(均P<0.05).以上结果在SLPI组与Vector组的比较中得到验证.结论 SLPI高表达促进卵巢癌细胞增殖、迁移及抗凋亡能力.