CK-pan免疫组织化学染色联合弹力纤维染色时不同孵育方法对染色结果的影响

摘要

目的 探讨CK-pan免疫组织化学染色联合弹力纤维染色时不同孵育方法对染色质量、染色时间及试剂成本的影响.方法 选取温州医科大学附属台州医院2018年1至3月诊断为肺癌胸膜侵犯并符合质控要求的30例患者的病变组织蜡块30个,所有蜡块均连续3μm切片3张,各取1张归入A、B、C组.全部切片先行CK-pan免疫组织化学染色至DAB显色,再滴加Elastin染液进行弹力纤维染色,3组切片根据不同方法孵育:A组室温过夜孵育(约18 h);B组60°C烤箱孵育30 min;C组覆盖罗氏液体封盖膜微波高档孵育60 s.比较3组切片双重染色后Elastin染液干涸情况、双重染色评分和染色总时间.结果 所有切片肺组织肿瘤细胞呈棕色,准确定位于细胞质,背景清晰.A组所有切片Elastin染液均完全干涸;B组中29张切片Elastin染液未干涸,仅稍有挥发,1张切片Elastin染液小部分干涸;C组中28张切片Elastin染液均匀覆盖,未见挥发,2张切片Elastin染液大部分干涸.A组30张切片均较难分化,整个背景非特异着色明显;B组29张切片容易分化,背景干净,1张切片稍难分化,局部轻微背景着色;C组28张切片,易分化,背景干净,2张切片较难分化,出现较大范围背景着色.A组双重染色评分(9.15±0.17)分,B组(9.39±0.13)分,C组(9.27±0.17)分,3组比较差异有统计学意义(P<0.05).A组染色总时间(21.5 h)>B组染色总时间(4 h)>C组染色总时间(3.5 h).结论 Elastin染液60°C烤箱孵育对于提高双重染色的染色质量、缩短染色时间及节约试剂成本均有积极意义,值得推广.