氟康唑诱导热带念珠菌凋亡机制的研究

摘要

目的观察氟康唑对热带念珠菌作用后存活率、活性氧(ROS)、线粒体膜电位(△Ψm)和细胞周期的变化,初步探讨其作用机制。方法参照CLSIM27A方案中的微量稀释法测定氟康唑对热带念珠菌的最低抑菌浓度(MIC);热带念珠菌在加入不同浓度氟康唑培养后,流式细胞术(FCM)分析荧光探针碘化丙啶(PI)标记存活率、荧光探针双氢罗丹明(DHR)标记ROS、荧光探针四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物(JC-1)标记线粒体△Ψm和DNA-Prep试剂盒标记细胞周期的变化。结果氟康唑作用后,热带念珠菌氟康唑耐药株存活率、ROS、线粒体△ψm和细胞周期各期比例均没有明显变化;而热带念珠菌氟康唑敏感株存活率和线粒体△ψm明显下降,ROS明显升高,而且大部分热带念珠菌阻滞于G2/M期,G01期热带念珠菌减少,呈一定的时间剂量依赖关系;且ROS升高与线粒体△Ψm成正相关(r=0.913,P0.05)。结论氟康唑可能提高刺激后热带念珠菌产生ROS,导致线粒体△ψm的改变和G2/M阻滞,从而诱导热带念珠菌凋亡。