肿瘤抑制基因PTEN INPP4B双沉默BEAS-2B细胞系的构建

摘要

目的 构建肿瘤抑制基因PTEN、INPP4B双沉默肺支气管上皮细胞系,为今后细胞功能研究提供依据.方法 通过MSCV-PM-shINPP4B-2、MSCV-PM-shPTEN-1质粒分别构建稳定沉默PTEN、INPP4B的BEAS-2B细胞系,通过MSCV-PM-shINPP4B-2、MSCV-PM-shPTEN-1质粒构建双沉默PTEN及INPP4B的BEAS-2B细胞系.应用MTT实验分别检测shFF2对照组,shPTEN-1沉默组,shINPP4B-2沉默组,shPTEN-1、shINPP4B-2双沉默组BEAS-2B细胞系的增殖情况.结果 Western blot结果显示PTEN、INPP4B基因在单沉默及双沉默细胞中蛋白表达量比相应的对照组均显著降低,表明PTEN、INPP4B沉默BEAS-2B细胞系构建成功.PTEN、INPP4B沉默组细胞增殖速度均高于对照组细胞,PTEN、INPP4B双沉默组细胞增殖速度低于对照组细胞.结论 PTEN与INPP4B双沉默BEAS-2B细胞系构建成功,双沉默组细胞增殖速度低于对照组细胞.