ANIT诱导亚急性肝内胆汁淤积大鼠模型肝脏氧化应激水平及胆汁酸受体表达的变化

摘要

目的观察异硫氰萘酯(ANIT)诱导亚急性肝内胆汁淤积大鼠模型肝脏氧化应激水平及胆汁酸受体表达的变化。方法雄性SD大鼠随机分为正常组24只,模型组24只,模型组在第1、7、14、21天分别灌服1.6%ANIT80 mg/kg,正常组以等量麻油灌胃,分别在第9、16、23天各处理大鼠8只。各大鼠于处理前晚禁食不禁水,次日上午空腹麻醉下腹腔静脉取血,分离血清检测肝功能;分离肝组织,部分在10%中性甲醛中固定行病理观察,其余肝组织存入-80°C待用,黄嘌呤氧化酶法测定肝组织SOD活力,硫代巴比妥酸(TBA)法测定肝组织MDA含量,比色法测定肝组织GSH-PX和CAT活力,荧光定量PCR测定肝组织Nrf2、SOD1、SOD2、SOD3、CAT、FXR、Ntcp、Bsep、Mrp2、Mrp3基因的mRNA表达。结果模型组大鼠在每次给药后48 h血清ALT、AST、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL水平比正常组明显升高(P<0.01),血清ALB水平比正常组明显下降(P<0.01),其在三个时相点均维持明显的肝内胆汁淤积,并出现早期肝纤维化表现。在三个时相点,模型组肝组织MDA含量均比正常组明显升高(P<0.01),而SOD、GSH-Px、CAT的活性比正常组明显降低(P<0.01),肝组织SOD1、SOD2、SOD3、CAT、FXR、Ntcp、Bsep、Mrp2的mRNA表达比正常组明显下降(P<0.05或P<0.01),Mrp3 mRNA比正常组明显增加(P<0.01);模型组肝组织Nrf2的mRNA表达在第16、23天比正常组明显下降(P<0.01)。结论ANIT间隙性多次给药可成功诱导大鼠亚急性肝内胆汁淤积,其发生过程中存在氧化应激及胆汁酸代谢障碍。