补肾益肺消癥方对肺纤维化上皮间质转化中瘦素相关因子的影响

摘要

目的:明确肺纤维化上皮-间质转化(EMT)对瘦素相关因子的影响,对瘦素加速EMT的分子机制进行初探,并观察补肾益肺消癥方对EMT过程中瘦素相关因子的作用。方法:将A549细胞根据干预手段不同分为正常组、模型组[转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))]、中药组(TGF-β_(1)+补肾益肺消癥方)、尼达尼布组(TGF-β_(1)+尼达尼布),免疫荧光观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中的瘦素水平,Western Blotting检测瘦素受体(LEPR)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的蛋白含量以及STAT3的活化程度。结果:与正常组比较,模型组细胞上清中瘦素水平升高(P<0.01),中药组、尼达尼布组出现不同程度的下降(P<0.001);与正常组比较,模型组LEPR蛋白表达升高(P<0.001),PPAR-γ表达下降(P<0.05),STAT3活化水平降低,中药组、尼达尼布组LEPR蛋白表达下调(P<0.001),PPAR-γ表达上调(P<0.05),中药组STAT3活化程度与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),尼达尼布组与模型组比较,STAT3活化水平升高(P<0.01)。结论:EMT可促进细胞内源性肺瘦素的分泌,增加细胞表面LEPR的表达,下调与瘦素有拮抗作用的PPAR-γ的含量,减少STAT3的活化,为瘦素加速EMT进程提供物质基础。而补肾益肺消癥方则可能通过降低内源性肺瘦素分泌,减少LEPR,提高PPAR-γ的水平逆转此过程。