推拿改善T2DM大鼠糖脂代谢性炎性损伤的分子机制研究

摘要

目的:观察推拿对2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)大鼠腹直肌组织腺苷酸活化蛋白激酶α2(AMPKα2)、核因子-κB(Nuclear Factor-κB,NF-κB)及白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)基因转录及蛋白表达的影响,探讨其改善T2DM大鼠代谢性炎性损伤的分子机制.方法:选取40只Wistar大鼠,随机取出6只为空白组,其余高脂高糖饮食联合低剂量(35 mg/kg)链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM模型,成模大鼠32只随机分入模型组、西药组、推拿组及西药推拿组.空白组及模型组每日灌胃蒸馏水,西药组每天以250 mg/kg标准进行二甲双胍灌胃1次,推拿组每日给予推拿手法治疗1次,西药推拿组在相同给药标准基础上每日加用推拿治疗1次.共干预8周,分别记录第2、4、8周的空腹血糖(Fast Blood Glucose,FBG)值,并运用realtime-PCR测定腹直肌AMPKα2、NF-κB及IL-6基因转录,Western-blot测定腹直肌AMPKα2及NF-κB蛋白含量,ELISA测定IL-6蛋白含量.结果:与模型组比较,西药组及西药推拿组FBG在第2、4、8周时显著下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),推拿组FBG在第4、8周时显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);与西药组比较,西药推拿组在第4周降糖效果更为显著,差异有统计学意义(P<0.05);与推拿组比较,西药推拿组在第4、8周时降糖效果更为显著,差异有统计学意义(P<0.05);与0周时比较,各观察组FBG在第2、4、8周时,均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与空白组比较,模型组AMPKα2mRNA转录及蛋白表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西药组、推拿组、西药推拿组AMPKα2 mRNA转录及蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05).与空白组比较,模型组NF-κBmRNA转录显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西药组NF-κBmRNA转录下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,推拿组NF-κBmRNA转录及蛋白表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西药推拿组NF-κBmRNA转录和蛋白表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与空白组比较,模型组IL-6 mRNA转录升高,差异有统计学意义(P<0.05),蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,西药组、推拿组及西药推拿组IL-6基因转录均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),蛋白表达均显著下降,差异有统计学意义(P<0.01).结论:推拿可改善T2DM大鼠的空腹血糖,并通过上调骨骼肌AMPKα2基因转录与蛋白表达,下调NF-κB、IL-6基因转录与蛋白表达,发挥其改善糖脂代谢性炎性损伤的手法效应.