疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H1N1感染的A549细胞凋亡的影响

摘要

目的：探讨疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H1N1感染的A549细胞凋亡的影响。方法：培养人肺腺癌上皮细胞A549，甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后，以达菲为药物对照组，利用基因芯片技术通过KEGG pathway分析涉及细胞凋亡信号传导途径。研究疏风宣肺方与解表清里方凋亡信号通路中基因转录的变化；同时采用荧光定量PCR检测各组细胞中的肿瘤坏死因子受体超家族成员6（Fas）、Fas配体（FasL）及天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白-3、-8、-9（Caspase-3、-8、-9）mRNA表达的变化；Western blotting法检测各组细胞中蛋白的变化。结果：与细胞对照组相比，H1N1感染组差异表达基因Casp3、Casp8、Casp9、Fas、Fasl明显上调，奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Casp8、Casp7、Fas、Fasl明显下调；qRT-PCR结果显示，与细胞对照组比较，H1N1感染组Caspase-3、-8、-9、Fas、FasL的mRNA表达均显著升高（P＜0.01）；与H1N1感染组比较，疏风宣肺组Caspase-3、-8、-9、Fas、FasL的mRNA表达均明显降低（P＜0.05）,解表清里组Cas-pase-3、-9、Fas、FasL的mRNA表达均明显降低（P＜0.05）。同时疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Western blotting结果显示，H1N1感染组Fas、FasL蛋白细胞较对照组显著升高（P＜0.05）。与H1N1感染组比较，2种方药的Fas、FasL表达均显著降低（P＜0.05）；qRT-PCR结果与基因芯片结果基本一致。结论：疏风宣肺方与解表清里方均可调控甲型流感病毒感染后的Caspase-3、-8、-9、Fas、FasL表达，可对抗流感病毒感染后的细胞凋亡。