口腔癌细胞通过传递性内质网应激影响胰岛β细胞功能的初探

摘要

目的探究口腔癌细胞是否通过传递性内质网应激(TERS)影响胰岛β细胞功能。方法选用衣霉素(TM)作为内质网应激(ERS)剂、人口腔鳞癌细胞系CAl-27、SCC-25作为供体细胞、小鼠胰岛素瘤6细胞系MIN6作为受体细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、蛋白免疫印迹(WB)检测ERS标志物及胰岛素表达情况,通过脱氧核苷酸末端转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡水平,采用克隆形成检测细胞增殖能力,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)、二喹啉甲酸(BCA)试剂盒检测胰岛β细胞分泌功能。结果对MIN6细胞施加TM刺激,通过qPCR、WB发现,ERS标志物上调,这意味着MIN6细胞能产生ERS。将ERS的口腔癌细胞的上清液加入MIN6细胞,通过qPCR、WB发现ERS的口腔癌细胞可诱导MIN6细胞出现ERS,即发生TERS现象;通过TUNEL实验,发现TERS的MIN6细胞凋亡增加;通过克隆形成实验,发现TERS的MIN6细胞增殖能力下降;通过qPCR、WB发现,TERS的MIN6细胞的胰岛素合成减少,在翻译水平抑制胰岛素的合成;通过ELISA、BCA发现,TERS的MIN6细胞分泌功能下降。结论口腔癌细胞可通过TERS引起胰岛β细胞应激,导致其凋亡增加,存活能力下降,合成及分泌胰岛素能力下降。