维生素D3刺激髁突软骨细胞内钙释放及机械压力对其影响的研究

摘要

目的探讨维生素D3(1,25(OH)2D3)刺激体外培养的兔髁突软骨细胞内钙离子的释放通道及机械压力对其影响.方法消化法培养新西兰白兔髁突软骨细胞,分别进行肝素(20 g/L)、普鲁卡因(1 g/L)钙通道阻断处理,及用自行设计制作的可控液压细胞加载装置分别进行90 kPa 60 min和90 kPa 360 min的加压处理,经钙荧光指示剂Fluo-3负载后,用激光扫描共聚焦显微镜测定10 -8 mol/L 1,25(OH)2D3100 μL刺激前后髁突软骨细胞内钙随时间变化情况,同时设有对照组.结果 1,25(OH)2D3刺激后对照组细胞内荧光强度随时间明显升高;普鲁卡因处理组变化与其相似,而肝素处理组在刺激前后胞内荧光强度无明显变化;90 kPa加压60 min处理组在接受1,25(OH)2D3刺激后胞内荧光强度也随时间明显升高,且其升高幅度显著高于对照组,而90 kPa加压360 min处理组在刺激后胞内荧光强度虽也有升高,但与对照组无显著差异,且在记录末期出现下降趋势.结论 1,25(OH)2D3能刺激髁突软骨细胞内三磷酸肌醇受体(IP3R)钙释放通道开放,使细胞内钙离子水平显著升高;一定的机械压力预调可改变该细胞内IP3通道对刺激的敏感性.