紫藤脉花叶病毒cp基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

摘要

采用RT-PCR方法自紫藤脉花叶病毒北京分离物(WVMV-BJ)的基因组中分离出其CP基因,连接到原核表达载体pET22b(+)上。获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot分析表明,cp基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白分子量约为34.4kDa。将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性较高的抗血清。微量免疫沉淀法测定该抗血清的效价为1/1024,酶联法(enzyme-linkedimmunosorbantassay,ELISA)测定的效价为1/8192。