Survivin反义寡核苷酸对卵巢癌细胞株凋亡和侵袭、迁移的影响

摘要

目的:观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3凋亡和侵袭、迁移的影响,探讨其作用的分子机制和临床价值.方法:用脂质体LipofectamineTM2000介导ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力的改变,流式细胞学技术检测细胞凋亡指数及survivin、Smac、VEGF蛋白表达改变,逆转录酶链反应(RT-PCR)检测survivin、Smac/DIABLO、VEGF基因表达改变.结果:脂质体LipofeetamineTM2000介导ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,FCM及共聚焦显微镜(SLM510)检测结果显示转染率＞95%.用600 nmol/L ASODN转染48 h后,细胞迁移和侵袭能力下降(t=3.47,P＜0.05;t=5.72,P＜0.01).细胞凋亡指数(AI)明显增加(t=6.37,P＜0.05).Survivin mRNA和蛋白表达明显下调(t=3.50,P＜0.05;t=7.81,P＜0.01),Smac mRNA和蛋白表达上调(t=-2.80,P＜0.05;t=11.39,P＜0.01),VEGF mRNA和蛋白表达明显下调(t=2.54,P＜0.05;t=33.84,P＜0.01).结论:ASODN可诱导卵巢癌细胞凋亡,降低卵巢癌细胞侵袭和迁移能力.这些作用是通过下调survivin、VEGF基因,上调Smac基因表达来共同完成的,他们之间的相互作用可能是卵巢癌发生、发展和转移的重要分子机制,survivin可能在其中起关键性作用.针对survivin的基因治疗将成为卵巢癌治疗的重要手段,有重要的临床价值.