膀胱癌细胞中锌指蛋白A20对核转录因子κB抑制的机制探讨

摘要

目的 为了探讨锌指蛋白A2 0在膀胱癌细胞中抑制核转录因子κB（NuclearTranscriptionFactorKappaB ,NF κB）作用的可能机制。方法 转染绿色荧光蛋白融合的A2 0质粒 （GreenFluorescentProteinfusedA2 0 ,GFP A2 0 ）和A2 0显性失活突变体质粒 [GFP A2 0 （1- 36 8） ]入膀胱癌细胞T2 4 ,荧光显微镜观察质粒在细胞中表达情况 ,RT PCR检测肿瘤坏死因子受体I（Tu morNecrosisFactorReceptorⅠ ,TNFRⅠ ）、核转录因子κB受体激活子配体 （ReceptorActivatorofNF κBLigand ,RANKL）、NF κB抑制蛋白ⅠκBα的mRNA表达变化。结果 转染 2 4h后 ,质粒在细胞中稳定表达 ,4 8h后表达继续增加。转染A2 0质粒或A2 0显性失活突变体质粒 2 4h及 4 8h后 ,TNFRⅠ和RANKLmRNA表达无明显变化 （P ＞0 .0 5 ）。而在这两个时间点处 ,A2 0质粒转染可明显抑制细胞内ⅠκBαmRNA的表达 ;A2 0质粒处理组与未处理组之间、A2 0质粒转染组与显性失活突变体质粒转染组之间差异均有显著性 （P ＜0 .0 1）。结论 A2 0作用于TNFR的下游对NF κB起抑制作用 ,ⅠκBαmRNA可能作为NF κB报告基因受A2 0抑制。