胆碱能抗炎通路对内毒素复合油酸致大鼠急性肺损伤的影响

摘要

目的研究胆碱能抗炎通路（cholinergic anti-inflammatory pathway，CAP）对内毒素复合油酸2次打击致大鼠急性肺损伤（acute lung injury，ALI）的影响及其可能的作用机制。方法24只雄性Wistar大鼠，体质量250±20g。按数字表法将大鼠随机分为4组，每组6只。①对照组（control group，C组）：腹腔注射生理盐水10mL·kg-1；②急性肺损伤（ALI）组：腹腔注射1％内毒素（lipopolysaccharide，LPS）10mg·kg-1，30min后静脉注射油酸（oleic acid，OA）0．15mL·kg-1；③电刺激（stimulation，ST）组：右颈迷走神经干连接刺激电极，以5V、2ms、1Hz强度持续刺激神经10min，腹腔注射1％LPS10mg·kg-1，再持续刺激神经10min，20min后静脉注射OA0．15mL·kg-1；④他克林（tetrahydroaminoacridine，THA）组：静脉注射胆碱酯酶抑制剂THA1．5mg·kg-1，10min后行急性肺损伤操作。各组动物均于130min后从颈总动脉采血1mL行血气分析，处死动物采集标本，分别检测肺组织Toll．样受体-2（Toll-like receptor-2，TLR2）和TLR4mRNA、核转录因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）p65、血清白介素-6（interleukin-6，IL-6）、肺组织髓过氧化物酶（mycloperoxidase，MPO）含量和肺组织湿质量-干质量比（wet weight／dry weight，W／D），HE染色观察左肺组织病理学改变。结果ALI组与C组比较，pH和动脉氧分压（partial pressure of oxygen，PaO2）均显著下降，二氧化碳分压（partial pressure of carbon dioxide，PaCO2）显著升高；肺泡破坏严重，有大量组织液渗出；肺组织W／D及MPO活性均显著增高；肺组织NF-κB P65蛋白表达明显增强；血清IL-6浓度显著升高：与C组相比，其余3个实验组肺组织TLR2和TLR4 mRNA表达均显著增加，组间比较差异无统计学意义；ST组和THA组与ALI组比较，pH和PaO2均显著升高，PaCO2显著下降；肺组织病理改变明显改善；肺组织W／D及MPO活性均显著降低：肺组织NF—κB p65蛋白表达及血清IL-6浓度显著下降。结论电刺激迷走神经或者静脉注射他克林可通过激活CAP，减轻LPS复合油酸2次打击致大鼠ALI时的炎性反应：其可能的机制是抑制NF-κB途径活化，在转录前水平发挥抗炎作用，但是不影响ALI时TLR2和TLR4mRNA的活化。