濒危药用植物降香黄檀DNA提取及RAPD反应体系优化

摘要

采用改良CTAB法提取了降香黄檀(Dalbergia odorifera T. Chen)新鲜叶片和硅胶干燥后放置3个月的叶片基因组DNA,并对影响RAPD反应的各因素进行了优化.结果显示新鲜的降香黄檀叶可以得到质量较高的DNA,硅胶保存后部分叶片所提的DNA有降解.优化后反应体系为:25μL反应体系中包括,模板的DNA 20ng,Taq DNA Polymerase 2.5U,Mg2+ 5mmol·L-1,dNTP 0.3 mmol·L-1,引物(S37)0.4 μmol·L-1.反应条件为94℃预变性4min;94℃ 30s,36℃ 1min,72℃ 2min,40个循环;72℃延伸 10min.