miR-301a对小鼠坏死性小肠结肠炎的影响及作用机制

摘要

目的观察miR-301a对小鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)的影响及作用机制。方法将60只新生BALB/c小鼠采用随机数字表法分为对照组、NEC组、miR-301a拮抗剂组,每组20只。NEC组、miR-301a拮抗剂组通过人工喂养、缺氧和冷刺激5 d建立NEC模型,miR-301a拮抗剂组给予miR-301a拮抗剂。实验期间记录小鼠体质量,HE染色观察各组肠道组织病理改变,并对肠组织进行损伤评分;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-8的含量。采用TUNEL法测定不同组小鼠肠组织的细胞凋亡情况,qPCR检测miR-301a和胱天蛋白酶(Caspase)-1基因表达水平,Western blot检测Caspase-1蛋白表达水平。结果与对照组相比,NEC组小鼠体质量减轻,肠组织出现明显的炎症损伤,损伤评分升高;血清中TNF-α、IL-6和IL-8的含量升高,肠组织细胞凋亡指数增加,miR-301a和Caspase-1的表达水平升高(均P<0.05)。与NEC组相比,miR-301a拮抗剂组小鼠NEC症状明显减轻,损伤评分及血清TNF-α、IL-6和IL-8含量明显下降,肠组织细胞凋亡指数下调,miR-301a和Caspase-1的表达水平降低(均P<0.05)。结论miR-301a在小鼠NEC肠组织中表达增加,下调miR-301a可以在一定程度上抑制小鼠的NEC进展。