新生大鼠海马神经干细胞的体外培养及鉴定

摘要

目的 探讨新生大鼠海马神经干细胞(NSC)的体外培养和诱导分化的条件和特点.方法 分离出生1d大鼠海马,在表皮生长因子、碱性成纤维生成因子和B27联合作用下使其稳定增殖,用5-溴脱氧尿苷(brdU)标记处于增殖状态的神经干细胞,应用免疫荧光染色方法行巢蛋白(Negtin)、5-溴脱氧尿苷(RrdU)、β-Ⅲ型微管蛋白(Tuj-1)、波形蛋白(Vimentntin)和Gelc-C免疲荧光染色,对NSC的增殖及其分化的细胞进行鉴定.结果 体外培养的NSC增殖成神经干细胞球并传代,鉴定为Neatin,粢色阳性细胞和5-溴脱氧尿苷(BIdU)标记粢色阳性细胞,并可诱导分化为神经元细胞(Tuj-1染 色阳性细胞)、神经胶质细胞(Vimentin染色阳性细胞)和少突胶质细胞(Galc-C染色阳性细胞).结论 采用无血清培养墓中加入特定生长因子的培养技术,可培养出在体外稳定增殖并有多向分化潜能的新生大鼠海马NSC.