猪白细胞介素2与融合白细胞介素4/6基因共表达的免疫效应研究

摘要

目的 构建猪融合白细胞介素4/6与猪白细胞介素2基因的共表达载体,研究其共表达对小鼠免疫的协同效应.方法 以2A自剪接技术首次构建猪融合白细胞介素4/6与白细胞介素2基因的共表达重组质粒,以壳聚糖纳米材料包裹制成纳米颗粒,进行体外转染HEK293细胞,提取总RNA进行RT-PCR分析,最后肌肉注射小鼠进行体内实验并分析.结果 成功构建了重组共表达质粒VRIL4/6-2;壳聚糖包裹后转染HEK293细胞,48 h后收集细胞,RT-PCR检测显示目的基因能够在HEK293细胞中高效地转录与表达.小鼠接种实验结果表明,实验组血清中的IgG和IgG2a的含量比对照组显著增加,并且VRIL4/6-2-CS接种组的小鼠体液免疫水平明显增高(P＜0.05);VRIL4/6-2实验组的CD4+淋巴细胞显著多于其它实验组(P＜0.05);实验组IL-2、IL-4、IL-6、IL-23基因的表达水平明显高于对照组(P＜0.05),实验组小鼠外周血白细胞、血小板和血红蛋白的含量均显著高于对照组(P＜0.05).结论 VRIL4/6-2共表达质粒能够更好的增强动物体液免疫和细胞免疫机能,可作为提高动物体液免疫和细胞免疫的经济高效安全新型免疫调节剂,具有潜在的重要应用前景.