α-硫辛酸对波动性高糖诱导乳鼠雪旺细胞损伤的影响及机制

摘要

cqvip:目的探讨α-硫辛酸(ALA)对波动性高糖诱导乳鼠雪旺细胞(SC)损伤的影响及机制。方法原代培养Wistar乳鼠SC,将其随机分组,正常对照组用5.6 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基培养;稳定性高糖组用50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基培养;波动性高糖组用5.6 mmol/L葡萄糖的DMEM与50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基交替培养,每8 h更换培养液;低、中、高浓度ALA组在波动性高糖组基础上分别加50、100、200μmol/L ALA进行培养。均干预48 h收集各组细胞。用ELISA法检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),用流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP),用TUNEL法测算细胞凋亡率,用Western blotting法检测细胞内B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(bax)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(cleaved-caspase-9)、cleaved-caspase-3及线粒体、胞质内细胞色素C(cyto C)蛋白表达。结果与正常对照组、稳定性高糖组比较,波动性高糖组细胞培养液中MDA水平高,SOD水平低,SC凋亡率高,MMP低,Bcl-2蛋白相对表达量低,bax、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3蛋白相对表达量高(P均<0.05);线粒体内cyto C蛋白表达低,而胞质中cyto C蛋白表达高(P均<0.05)。与波动性高糖组比较,低、中、高浓度ALA组培养液中MDA水平低,SOD水平高;MMP高;细胞内Bcl-2蛋白相对表达量高,bax、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3蛋白相对表达量低(P均<0.05);线粒体cyto C蛋白表达高,胞质中cyto C蛋白表达低(P均<0.05),且以上指标变化呈浓度依赖性。结论ALA可通过线粒体途径抑制SC凋亡,对波动性高糖损伤的乳鼠SC有保护作用,且该作用呈浓度依赖性。