CD151及其整合素突变体对肝癌细胞侵袭能力的影响及机制

摘要

目的探讨CD151及其整合素结合突变体(CD151-MUT)对肝癌细胞侵袭能力的影响,并探讨其与FAK-Src-paxillin信号通路的关系。方法取人肝癌细胞株HepG2,随机分为对照组、CD151组和CD151-MUT组。对照组加入生理盐水,CD151组和CD151-mut组分别转染pAAV-CD151质粒、pAAV-CD151-AAA质粒,孵育4 h。继续培养24 h后收集细胞,采用Transwell小室实验观察各组细胞侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞CD151及FAK-Src-paxillin通路活性,免疫共沉淀法检测CD151、CD151-mut与整合素α3、α6、β1的结合情况。结果CD151组Transwell小室实验穿膜细胞数较对照组增加,CD151-mut组穿膜细胞数较CD151组减少(P均<0.05)。CD151组、CD151-mut组CD151蛋白表达均较对照组表达增加(P均<0.05),CD151组与CD151-mut组比较差异无统计学意义。CD151组p-FAK、p-Src、p-paxillin蛋白表达水平较对照组升高,CD151-mut组p-FAK、p-Src、p-paxillin蛋白表达水平较CD151组降低。免疫共沉淀结果显示,CD151与整合素α3、α6和β1结合形成复合体,CD151组结合整合素α3、α6、β1水平高于对照组(P均<0.05),而CD151-mut组结合整合素α3、α6、β1水平低于CD151组(P均<0.01)。结论CD151高表达可促进肝癌细胞的侵袭,破坏CD151和整合素复合体的形成则细胞的侵袭能力减弱;该机制与调控FAK-Src-paxillin信号通路蛋白的活性有关。